Aplicación de CRISPR/Cas9 para disminuir el pardeamiento enzimático en tubérculos de Solanum tuberosum L.

MATÍAS GONZÁLEZ; MASSA GABRIELA ALEJANDRA; MARTÍN CASTELLOTE; CECILIA DÉCIMA ONETO; LEONARDO STORANI; FEINGOLD SERGIO ENRIQUE

Bahía Blanca

Simposio; XI Simposio Nacional de biotecnología Redbio 2017; 2017

Las Polifenol oxidasas (PPO)son enzimas que catalizan la conversión de mono-fenoles a orto-difenoles y  orto-quinonas. Estos compuestos producenpigmentos negros (Thygesen et al., 1995) en un proceso conocido como PardeamientoEnzimático. En la producción de papa (Solanum tuberosum L.) estasreacciones producen grandes pérdidas económicas durante los procedimientos de cosecha y pos cosecha. El sistema de edicióngénica CRISPR/Cas9, se ha convertido en una de las herramientas másimportantes no solo para la genómica funcional, sino también para elmejoramiento de cultivos de consumo humano (Pacher y Puchta, 2016). En papa, lasPPO se encuentran codificadas por una familia de al menos 6 genes (Thygesen etal., 1995) cada uno responsable de la expresión de forma tejido-específica.Con el objetivo de obtener plantas con supresión de la actividad de PPO en tubérculo,se llevó a cabo la identificación de los genes de PPO en Solanum tuberosumL. Los genes responsables de la expresión de PPO en tubérculo fueronsecuenciados en los genotipos de interés. Posteriormente, se llevó a cabo eldiseño de los sgRNAs con sitios target en el gen PPO candidato y seobtuvo el vector CRISPR_PPO  para suexpresión en papa.