Rol del pigmento estaloxantina en la fotoinactivación bacteriana de Staphylococcus aureus.

ROCIO DIAZ; ANDREA LOMBARTE SERRAT; DANIEL SAENZ; GUSTAVO CALVO; MAURICIO SULIGOY; DANIEL SORDELLI; ADRIANA CASAS; FERNANDA BUZZOLA

CABA

Congreso; 17° Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2018

Hospital de Clínicas "José de San Martín", Universidad de Buenos Aires

0398- ROL DEL PIGMENTO ESTAFILOXANTINA EN LA FOTOINACTIVACION DE STAPHYLOCOCCUSAUREUS RocioEster DIAZ(1) | Andrea LOMBARTE SERRAT(1) | Daniel SAENZ(2) | Gustavo CALVO(2)| Mauricio SULIGOY(1) | Daniel SORDELLI(1) | Adriana CASAS(2) | FernandaBUZZOLA(1) INSTITUTO DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA MÉDICA - IMPAM.UBA-CONICET. (1); CIPYP-CONICET- HOSPITAL DE CLÍNICAS JOSÉ DE SAN MARTÍN-UBA(2) Modalidad:Poster Científico (excluye Reporte de Un Caso) UnidadTemática: Infectología Objetivos:Estudiar la respuesta de S. aureusmediada por la STX frente a la inactivación fotodinámica en presencia oausencia del fotosensibilizante azul de toluidina (AT). Materialesy Métodos: Se utilizaron las cepasisogénicas SH1000 y RN6390 y los aislamientos clínicos Sa14 y Sa14P de S. aureus. Las extracciones del pigmentoa partir de suspensiones bacterianas con igual densidad óptica se realizaroncon metanol y se cuantificaron espectrofotométricamente a 450 nm (DO450).Para la fotoinactivación bacteriana se irradiaron las bacterias con luz blancano coherente durante 60 min luego de la incubación en oscuridad con 50 μM deAT. La eficiencia del tratamiento se determinó mediante el recuento de lasUFC/ml. En ausencia de bacterias, se cuantificó fluorométricamente lageneración de oxígeno singlete producido al iluminar la solución con AT enpresencia o ausencia del extracto de STX. Resultados:En las suspensiones de S. aureus conigual DO600 se cuantificaron espectrofotométricamente los niveles deSTX: SH1000 (0.468±0.045), RN6390 (0.164±0.096), Sa14 (0.205 ±0.033) y Sa14P(0.450±0.123). La producción del pigmento por SH1000 y RN6390 se mantuvo encantidades similares a las iniciales hasta el día 14. Los espectros deabsorción de la STX extraída fueron similares entre las cepas SH1000 y Sa14P yentre Sa14 y RN6390. Por otro lado, la irradiación durante 60 min del pigmentoextraído de la cepa SH1000 redujo a un 22% la cantidad del mismo (DO450:0.427±0.028 a 0.094±0.018). Se comprobó que la STX actúa como secuestranteespecífico de oxígeno singlete, ya que inhibió a la mitad (disminución de 605 a315 unidades de fluorescencia) la generación fotodinámica de esta especiereactiva. Para SH1000, RN6390 y Sa14, la fotoinactivación mediada por AT redujoen 4, 5 y 6 órdenes de magnitud, respectivamente, el número de bacteriascomparado con aquellas no irradiadas. Para Sa14P, el mismo tratamiento redujo 6órdenes de magnitud la cantidad de bacterias viables. Conclusiones: La STX estaríaactuando en ausencia de bacterias como secuestrante de radicales libres(oxígeno singlete), sin embargo no se observa una protección significativa dela acción fotoinactivadora entre las cepas con mayor producción de estepigmento. Debido a posibles diferencias en las defensas antioxidantes entrecepas, y el comportamiento de los agentes secuestrantes frente a la acción delas diferentes dosis lumínicas son necesarios estudios complementarios paraelucidar el rol de la STX en la fotoinactivación de S. aureus.