Modulación de la terapia fotodinámica inducida por ácido 5-aminolevulinico por sulfuro de hidrógeno en células de adenocarcinoma murino.

CALVO, GUSTAVO; DI VENOSA, GABRIELA; VALLECORSA, PABLO; MAMONE, LEANDRO; ORLANDO, CRISTIAN GABRIEL; BATLLE, ALCIRA; CASAS, ADRIANA; SAENZ, DANIEL

Ciudad de San Miguel de Tucumán, Tucumán, Argentina.

Otro; III Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos, GRAFOB del Bicentenario.; 2016

GRAFOB, Grupo Argentino de Fotobiologia

La terapia fotodinámica (TFD) es un tratamientopara inducir daño en un tejido después de la administración de un fármacofotosensibilizante activado (FS). Luego de su irradiación con luz visible enpresencia de oxígeno se generan especies reactivas del oxigeno (ROS)citotóxicas. El ácido 5-aminolevulínico (ALA) es el precursor del FSprotoporfirina IX, y la ALA-TFD es una de las técnicas de TFD más ampliamenteempleadas.El sulfuro de hidrógeno (H2S) ha sidoreconocido como un gas biológicamenteactivo,contribuyendo a muchos procesos fisiológicos y patológicos. Junto con el óxidonítrico (NO) y el monóxido de carbono son denominados transmisores gaseosos. Estos transmisores gaseososatraviesan libremente las membranas, se generan de forma endógenaenzimáticamente y tienen funciones definidas a concentraciones fisiológicas.El objetivo de estetrabajo fue estudiar el impacto de H2S en la respuesta del ALA-TFD. Empleamos dos líneascelulares de adenocarcinoma mamario murino, LM3 y LM2, que fueron provistas porel Instituto de Oncología A. H. Roffo. La línea LM3 produce NO mientras que laLM2 no. Ambas líneas producen H2S endógenamente.Las condiciones de laALA-TFD fueron: 3 h exposición a ALA 1 mM e iluminación con diferentes dosis deluz.Se determinaron porespectrofluorometría los niveles de porfirinas totales; por espectrofotometríalos niveles de NO, H2S y de oxidantes totales; y, utilizando unasonda específica, la producción de oxígeno singulete.Resultados: Laincubación de las células con NaHS, dador de H2S, no resultó tóxicoen el intervalo de concentraciones empleado (0,05-10 mM).La exposición de lascélulas LM2 a concentraciones crecientes de NaHS superiores a 0,5 mM, inhibiógradualmente la muerte celular inducida por la ALA-TFD y suprimió completamenteel efecto de la TFD a partir de 1 mM de NaHS. En las células LM3, la exposiciónprevia a NaHS no modificó la respuesta a la TFD. La síntesis de NO en lalínea LM3 es inhibida por H2S y o su precursor, cisteína.Las células LM2producen menos H2S a partir de cisteína que las LM3 (LM2:121±18 vsLM3: 239±26 nmoles H2S/106cel, *:p<0.05). El perfil de la acciónde los inhibidores de la síntesis de H2S, es diferente, para ambaslíneas celulares. La concentración de porfirinas sintetizadas a partir de ALA 1mM, disminuyó en una curva dosis respuesta, en presencia de NaHS, solo en lalínea LM2. El NaHS inhibe laproducción de ROS in vitro producidosdespués de la iluminación de un FS. Además, la utilización de Aspartato 10 mM,inhibidor de las enzimas CAT/3MST mejora la eficiencia de la PDT solo en lalínea LM2.Conclusiones: Estosresultados sugieren que los niveles de NO y H2S podrían estarinvolucrados en la diferente sensibilidad a la ALA-TFD  y la inhibición de la síntesis de H2Sendógeno podría mejorar el efecto de dicha terapia en ciertas líneas celulares deadenocarcinoma murino.