Terapia fotodinámica en el tratamiento de lesiones ateroscleróticas utilizando derivados dendríticos del ácido 5-aminolevulíco: estudios in vitro

CALVO, G; CÉSPEDES, M; SAENZ, D; JEREZ PELLEGRINO, T; VALLECORSA, P; BATLLE, A; CASAS, A; DI VENOSA, G

CABA

Congreso; 17° Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2018

Hospital de Clínicas "José de San Martín", Universidad de Buenos Aires

0045- TERAPIA FOTODINÁMICA EN EL TRATAMIENTO DE LESIONES ATEROSCLERÓTICASUTILIZANDO DERIVADOS DENDRÍTICOS DEL ÁCIDO 5-AMINOLEVÚLICO: ESTUDIOS IN VITRO GustavoHernan CALVO | Mariela A CÉSPEDES | Daniel Alberto SAENZ | Tamara JEREZPELLEGRINO | Pablo VALLECORSA | Alcira BATLLE | Adriana CASAS | Gabriela DIVENOSA CIPYP-CONICET-HOSPITAL DE CLÍNICAS JOSÉ DE SAN MARTÍN-UBA Modalidad:Poster Científico (excluye Reporte de Un Caso) UnidadTemática: Cardiovascular Objetivos:La Terapia Fotodinámica (TFD) es untratamiento antitumoral en el cual se administra un fotosensibilizante que selocaliza en el tumor. Al iluminar con una longitud de onda adecuada, sedesencadenan reacciones mediadas por radicales libres que inducen la muerte delas células tumorales. La fotosensibilización puede ser endógena con porfirinasbiosintetizadas a partir del ácido 5-aminolevúlico (ALA). Otro de los usosemergentes de la TFD es la Fotoangioplastía, para el tratamiento de laslesiones ateroscleróticas. La placa aterosclerótica está formada principalmentemacrófagos, linfocitos T y células de músculo liso. Dado que el ALA es unamolécula hidrofílica, su incorporación a la célula podría incrementarsemediante su modificación con sustituyentes que aumenten su lipofilicidad. Con elfin de optimizar la TFD se han diseñado compuestos dendrímeros conteniendo ALA,la captación de ellos por los macrófagos del sistema retículoendotelial ha sidoconsiderada en realidad como un hecho a evitar en la TFD del cáncer, ya que losmismos secuestran moléculas que deberían ser dirigidas a la zona tumoral peroresulta de gran utilidad en el tratamiento de lesiones ateroscleróticas,teniendo como objetivo el ataque selectivo de las placas ateromatosas mediantela fotosensibilización de sus componentes macrofágicos, dejando las estructurasvasculares intactas. El objetivo de este trabajo ha sido el de estudiar dosdendrímeros de ALA, evaluando la captación diferencial de dichos compuestos enmacrófagos y células endoteliales y su respuesta a la fotosensibilización, comomodelo de fotoangioplastía. Materialesy Métodos: Se emplearon dendrímerosde ALA conteniendo 6 ó 9 moléculas de ALA (6m-ALA, 9m-ALA) sintetizados enUniversity College London (R.U). Como modelo de fotoangioplastía se emplearonmacrófagos Raw 264.7 expuestos a los dendrímeros, analizando la síntesis deporfirinas por medio de extracción química y cuantificación fluorométrica.Paralelamente, como modelo de epitelio vascular, se usaron células demicroendotelio vascular inmortalizadas HMEC-1. La respuesta a la terapia fueevaluada cuantitativamente con ensayos de viabilidad, y cualitativamente pormicroscopía. Se calcularon las Dosis Letales 50 (LD50) como la dosis lumínicaexpresada en Joules/cm2 necesarias para matar el 50% de las células. El modeloabarcó tanto el estudio de ambas líneas celulares de manera individual como elcocultivo de las mismas. Resultados:Los resultados mostraron mayorsensibilidad a la TFD por parte de la línea macrofágica (LD50= 11,7 mJ/cm2)versus la línea endotelial (LD50= 44,6 mJ/cm2), acorde con una mayor síntesisde porfirinas en células Raw 264.7 (6m-ALA= 52 ± 6 μg porf/105 cél, 9m-ALA= 59± 7 μg porf/105 cél) respecto a la línea endotelial HMEC-1 (6m-ALA= 28 ± 3 μgporf/105 cél, 9m-ALA= 27 ± 2 μg porf/105 cél) empleando los dendrímeros de ALA.El cocultivo de ambas líneas mostró de manera cualitativa por microscopía defluorescencia y de campo claro, una mayor síntesis de porfirinas y mayorrespuesta a la terapia de la línea Raw 264.7. El análisis de citometría deflujo de células teñidas con un kit de anexina/ioduro de propidio paradeterminar apoptosis, demostró que luego de la exposición a los dendrímeros deALA, mientras que la línea endotelial no es dañada bajo condiciones de bajasdosis lumínicas, la línea macrofágica muere por apoptosis. Conclusiones: Los dendrímeros del ALA son promisorios en eltratamiento de la fotoangioplastía ya que los mismos demostraron in vitro tenerselectividad por el componente macrofágico de la placa ateromatosa, en comparacióncon el endotelio vascular.