Los glucocorticoides inhiben la expresión de interleuquina-17A, principal citoquina efectora del linaje de linfocito T de ayuda 17

ANTUNICA NOGUEROL, M; APRILE GARCIA, F; CASTRO, CN; BARCALA TABARROZI, AE; PERONE, MJ; LIBERMAN, AC; ARZT, E

Congreso; LVI Reunion Anual de SAIC; 2011

@font-face { font-family: "Arial"; }@font-face { font-family: "Calibri"; }p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal { margin: 0cm 0cm 10pt; line-height: 115%; font-size: 11pt; font-family: "Times New Roman"; }div.Section1 { page: Section1; } Los glucocorticoides (GCs) son ampliamente utilizados en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes dado su efecto anti-inflamatorio e inmunosupresor. Recientemente se ha identificado un nuevo linaje de linfocito T de ayuda (Th), Th17, implicado en la patogénesis de enfermedades autoinmunes. El factor de transcripción (FT) maestro de este linaje y principal responsable de la producción de su citoquina característica, interleuquina (IL)-17A, es RORγt. Dado que IL-17A está asociada al desarrollo de enfermedades autoinmunes e inflamatorias, nuestro objetivo es estudiar el efecto de los GCs sobre la producción de esta citoquina y en particular sobre la actividad transcripcional de RORγt con el fin de caracterizar el mecanismo molecular involucrado en la regulación de su actividad e identificar posibles blancos terapéuticos. Estudiamos el efecto del GC sintético dexametasona (Dex) (10-100nM) sobre la actividad del promotor de IL-17A en ensayos reporteros en la línea de linfoblastoma T murino, EL4, que expresa RORγt endógeno. Evaluamos el mecanismo molecular involucrado utilizando el inhibidor de histona-deacetilasas (HDACs) tricostatina A (TSA) (1uM). Analizamos la interacción entre el GR y RORγt mediante ensayos de coinmunoprecipitación. Evaluamos la expresión de IL-17A en presencia de Dex por qPCR. Observamos que Dex inhibe la actividad del promotor mínimo de IL-17A clonado río abajo del enhancer CNS-2 (50%, p<0.01), fuertemente regulado por RORγt. Esta inhibición se revierte en presencia del inhibidor de HDACs, TSA. También demostramos que el GR interactúa con RORγt. Observamos que Dex inhibe la expresión de IL-17A en cultivos primarios de esplenocitos tratados con concanavalina A (ConA) (2.5ug/ml) (50%, p<0.01) y en la línea celular EL4 (27%, p<0.01). Concluimos que los GCs inhiben la actividad del promotor y expresión de IL-17A. El mecanismo molecular involucrado estaría mediado por interacción del GR con el FT clave, RORγt, y el reclutamiento de HDACs.