MICRORNAS DE VESÍCULAS EXTRACELULARES PLASMÁTICAS COMO BIOMARCADORES DE FIBROSIS EN PACIENTES CON HEPATITIS C CRÓNICA

CAIROLI, VICTORIA; VALLE MILLARES, DANIEL; FERNANDEZ RODRIGUEZ, AMANDA; PRECIADO, MARÍA VICTORIA; VALVA, PAMELA

CABA

Workshop; I Workshop anual del Grupo Argentino de Vesículas Extracelulares; 2023

Grupo Argentino de Vesículas Extracelulares

Las vesículas extracelulares (VE) han adquirido gran importancia en la medicina de precisión como posible herramienta para evaluar la severidad daño hepático en pacientes con hepatitis C crónica (CHC). Los microRNAs (miRNAs) de las VE serían potenciales biomarcadores de daño dado su rol esencial en la regulación de la expresión génica y, en consecuencia, en el proceso de fibrogénesis. El objetivo del trabajo fue caracterizar la firma de miRNAs de VE plasmáticas en pacientes con CHC con distintos estadios de fibrosis hepática y evaluar su rol como biomarcadores de daño hepático.Se purificaron VE de plasma de 50 pacientes con CHC [36 % fibrosis significativa (F ≥ 2)] con exoRNeasy kit (QIAGEN). que se caracterizaron por microscopia electrónica (ME) de transmisión y cryo-ME y por NTA. Luego, se extrajo el RNA enriquecido en miRNAs, se secuenció masivamente, se identificaron los miRNAs y se realizó el análisis de expresión diferencial significativa (SDE) [fold change (FC) ≥ 1.5; p-valor ajustado (p.adj) ≤ 0.2] con respecto a la severidad de la fibrosis. Mediante el análisis de curvas ROC se evaluó el valor diagnóstico de los SDE miRNAs y de un score generado mediante un modelo de regresión logística múltiple que los incluye.La ME reveló la presencia de partículas esféricas con un diámetro medio de 130 nm. No se observaron diferencias significativas en el tamaño [F < 2: 172,2 nm (155,7; 186,7), F ≥ 2: 175,1 nm (162,5; 192,2), p = 0,287] o concentración [F < 2: 5,5E09 partículas/ml (4,2E09; 1E09), F ≥ 2: 5.2E09 partículas/ml (4.0E09; 7.1E09), p = 0.897] de las VE entre estadios de fibrosis. El SDE entre estadios de fibrosis mostró la up-regulación de miR-122-5p (FC = 3,06, FDR < 0,001) y la down-regulación de miR-92a-3p (FC = -1,5, FDR = 0,051). Ambos miRNAs mostraron un moderado poder para discriminar casos F ≥ 2 (AUROCmiR-122-5p = 0,746; AUROCmiR-92a-3p = 0,767). Sin embargo, el score generado con ambos miRNAs mostró un excelente poder discriminativo (AUROC = 0,858, sensibilidad: 100%, especificidad: 74,1%).Los pacientes con CHC con diferentes estadios de fibrosis hepática presentan perfiles específicos de miRNAs en VE plasmáticas. Esta firma específica permite la evaluación de los VE-miRNAs como posibles biomarcadores pronóstico y diagnóstico.