DESARROLLO DE UN MÉTODO DE DETECCIÓN DE MUTACIONES DE KRAS POR PCR DIGITAL EN CÁNCER COLORRECTAL PARA SU FUTURO USO COMO PESQUISA POBLACIONAL

BARRANCO, MARIA MANUELA; AGNELLA, YANINA; PAREDES, FRANCO; GARCIA SOLDO, CANDELA; BOGADO, JOSEFINA; CAPRILE, LUIS; GIRARDINI, JAVIER; SESMA, JULIANA

BUENOS AIRES

Congreso; XVI CONGRESO ARGENTINO E INTERNACIONAL DE ONCOLOGIA CLINICA; 2023

ASOCIACIONA ARGENTINA DE ONCOLOGIAA CLINICA

El cáncer colorrectal (CCR) es uno de los tres tipos de cáncer más frecuentes y es la segunda causa de muerte relacionada con cáncer en Argentina y en el mundo. La implementación de estrategias de detección precoz es fundamental para disminuir su morbimortalidad. El método de referencia para la detección del CCR es la colonoscopía, el cual es un método invasivo y de baja adhesión. La detección de sangre oculta en materia fecal como método de pesquisa no invasivo es de baja sensibilidad. La PCR digital en gotas (ddPCR) es una mejora de la técnica de PCR de tiempo real tradicional, que permite la detección de una secuencia de ADN presente en muy baja proporción, posibilitando la detección de ADN tumoral en muestras de sangre y heces. Objetivo: Diseño de dos multiplex, una para 3 y otra para 4 mutaciones drivers de KRAS y su comparación con informes de secuenciación genómica. Metodología:Extracción de ADN a partir de biopsias por QIAGENSecuenciación por SANGER (MACROGEN)ddPCR; diseño de primers y sondas en FAM y HEX, amplificación con nombre del kit. Resultados:Se secuenció por SANGER ADN extraído de 13 de biopsias con diagnóstico anatomopatológico de adenocarcionoma colónico, de las cuales 6 presentaron mutaciones en KRAS. 2 en G13D, 2 en G12D, y 2 sin identificación clara. Luego se realizó la ddPCR. Se confirmaron las mutaciones halladas. La ddPCR permite determinar mutaciones drivers puntuales que en un futuro se podrían utilizar como pesquisa poblacional en biopsias liquidas.