16. Inhibidor de iNOS afecta la transición epitelio mesenquimática en líneas celulares de glioblastoma.

HINCAPIÉ ARIAS EL, ; BELGOROSKY D ; ANA MARIA EIJAN

Jornada; XXXV Jornadas de Oncologia, 100 años del Instuto de Oncologia A.H.Roffo; 2022

INSTITUTO DE ONCOLOGIA A. H. ROFFO

Introducción: Los glioblastomas (GBM) son los tumores cerebrales malignos más frecuentes y agresivos. A pesar de la quimioterapia con temozolomida (TMZ) y radioterapia, la sobrevida es menor a 2 años. Se ha sugerido que la inhibición de la isoforma inducible de la enzima óxido nítrico sintasa (iNOS) está relacionada con la disminución de la proliferación de las células de este tumor.Objetivo: Evaluar el efecto del inhibidor de iNOS, S-metil-isotiourea (SMT), sola y en combinación con TMZ en la transición epitelio-mesenquimática (TEM) en cultivos celulares de GBM en monocapa (2D) y en esferas (nicho pluripotente).Metodología: Las líneas celulares de GBM humano, U251 y U87, se sembraron en 2D y en condición de esferas (baja adhesión y alta dilución). La viabilidad en 2D fue determinada por MTS. El número de células madre tumorales (CSC) se estableció mediante la eficiencia de formación de esferas (EFE) en relación al número de células sembradas; se midió el diámetro de cada esfera con imageJ. Se realizó extracción de ARN y retrotranscripción (rtPCR) de cultivos en 2D y en esferas para análisis posterior de genes pluripotencia y de TEM (Nestina, E-cadherina, Vimentina) por qPCR.Resultados: En 2D, SMT (5µM-1mM) no tiene efecto en la viabilidad celular. En esferas, SMT (50µM) disminuyó la EFE (inhibición vs. control, U251 40%; U87 50%) y sus diámetros (U251 17%; U87 28%). La combinación de SMT (50µM) con TMZ (20µM) disminuyó aún más la EFE (U251 60%; U87 70%) comparado a SMT o TMZ solas. En 2D, SMT disminuyó la expresión de Nestina (50%, p