INVESTIGADORES
BALLESTERO Jimena Andrea
congresos y reuniones científicas
Título:
“Utilización de regiones 5' no codificantes del gen Pou4f3 para dirigir la expresión de la subunidad alfa10 de receptores nicotínicos en células ciliadas cocleares.
Autor/es:
JULIÁN TARANDA; JIMENA BALLESTERO; JESSICA SAVINO; MARÍA EUGENIA GÓMEZ-CASATI; ELEONORA KATZ; DOUGLAS VETTER; BELÉN ELGOYHEN
Lugar:
Los Cocos, Córdoba, Argentina
Reunión:
Congreso; XXI Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencia; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencia (SAN)
Resumen:
  El Pou4f3 es un factor de transcripción  que se expresa en células sensoriales auditivas y vestibulares de mamíferos desde estadios embrionarios y que está involucrado en el desarrollo de estas células (Erkman et al., Nature, 381: 603, 1996).  Sobre la base de estas propiedades resulta de interés utilizar regiones del gen Pou4f3  con el fin de dirigir la expresión de transgenes a estas células. El gen CHRNA10 (alfa10) codifica para la subunidad que forma parte del receptor colinérgico (nAChR) alfa 9-alfa10 y sólo se expresa durante el desarrollo en las células ciliadas internas de ratas en períodos previos a la audición.  Su expresión se correlaciona con la presencia de receptores colinérgicos funcionales en dichas células.  Realizamos una  construcción para generar ratones transgénicos que expresen en forma constitutiva al gen CHRNA10, con el objetivo de evaluar las consecuencias para el proceso auditivo de la posible presencia de receptores nicotínicos funcionales en el animal adulto. Comprobamos por RT-PCR, in-situ radioactiva e inmunohistoquímica la presencia del RNA mensajero y  de la proteína en las células ciliadas.  A pesar de la presencia de la proteína en animales adultos se demostró a través de técnicas de patch-clamp en células ciliadas internas (CCI) la ausencia de receptores funcionales luego del comienzo de la audición.  Para confirmar la funcionalidad del transgén se realizó la cruza de un animal transgénico de alfa 10 con un animal Knock-out del gen CHRNA10  y se detectó por técnicas de pach-clamp un rescate del receptor funcional tanto en CCI como externas (CCE).