EL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALFA TRANSACTIVA AL RECEPTOR TIROSINA QUINASA ERBB2

MA RIVAS; M TKACH; W BEGUELIN; CJ PROIETTI; C ROSEMBLIT; V SUNDBLAD; MC DÍAZ FLAQUÉ; EH CHARREAU; PV ELIZALDE; R SCHILLACI

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; Reunion anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2008

Previamente demostramos que el TNFá induce la proliferación del adenocarcinoma mamario murino C4HD a través de la activación de la quinasa Akt y el factor de transcripción NF-êB. Dado que este tumor sobreexpresa ErbB2 y que el mismo cumple un papel crítico en la proliferación de las células C4HD, nosotros hipotetizamos que podrían existir interacciones entre el TNFá y ErbB2. Nuestros hallazgos muestran que el tratamiento de las células C4HD con el inhibidor de ErbB2, AG825, bloqueó la proliferación inducida por el TNFá. Resultados similares se obtuvieron utilizando la línea celular de cáncer de mama humano SKBR3, ampliamente utilizada en el estudio de la sobreexpresión de ErbB2. Además, el TNFá indujo un aumento en la fosforilación en tirosina de ErbB2 en células C4HD y SKBR3, en particular en los residuos Tyr 927/877 y Tyr 1272/1222. Luego estudiamos si la quinasa c-Src estaba involucrada en el efecto mencionado, dado que está reportado que es capaz de fosforilar a ErbB2 en el residuo Tyr 877/927. Observamos que la adición de PP2, un inhibidor de la familia de Src, inhibió completamente la fosforilación de ErbB2 en Tyr 927/877, y parcialmente la de Tyr 1172/1222. La c-Src activada por TNFá fue capaz de fosforilar in vitro a ErbB2 en Tyr 927. También observamos que la estimulación con TNFá indujo la asociación entre ErbB2 y ErbB3, y la unión de la subunidad p85 de PI3-K a ErbB3. El tratamiento con AG825 inhibió la activación de Akt y NF-êB por TNFá como se evidenció mediante western blots y ensayos de gen reportero. Estos resultados muestran por primera vez que el TNFá es una citoquina capaz de transactivar a ErbB2 a través de la activación de c-Src. Además demostramos que la activación de Akt y de NF-êB inducida por TNFá requiere de la fosforilación de ErbB2 en células de cáncer de mama que sobreexpresan ErbB2.