ROL DEL COMPLEJO NUCLEAR COMPUESTO POR EL RECEPTOR TIROSINA QUINASA ERBB2 Y LA PROTEÍNA TRANSDUCTORA DE SEÑALES Y ACTIVADORA DE LA TRANSCRIPCIÓN 3 (STAT3) EN CÉLULAS DE CÁNCER DE MAMA

W BEGUELIN; CJ PROIETTI; C ROSEMBLIT; MA RIVAS; V SUNDBLAD; MC DÍAZ FLAQUÉ; M TKACH; EH CHARREAU; R SCHILLACI; PV ELIZALDE

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; Reunion anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2008

Previamente demostramos que la heregulina (HRG) induce la localización nuclear de ErbB2 y su asociación con Stat3 en la línea celular de cáncer de mama humana T47D y en células C4HD, provenientes de un tumor mamario murino. También mostramos, mediante ensayos de inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP), que HRG induce el reclutamiento de Stat3 y ErbB2 a los sitios de unión de Stat3 en el promotor de ciclina D1, cuya expresión es regulada por HRG. Proponemos entonces que ErbB2, actuando como coactivador de Stat3, modula la proliferación de células de cáncer de mama. En este trabajo demostramos, mediante ensayos de ChIP secuencial, que Stat3 y ErbB2 se encuentran simultáneamente unidos al promotor de ciclina D1. Mostramos también que la inhibición de la localización nuclear de ErbB2 no afecta el transporte de Stat3. Para esto, silenciamos la expresión de ErbB2 de células C4HD y transfectamos con una mutante de ErbB2 humano que no puede translocar al núcleo (hErbB2DNLS). Mediante inmunofluorescencia y microscopía confocal, observamos que HRG mantuvo la capacidad de inducir la translocación nuclear de Stat3 en las células reconstituidas. Luego, evaluamos específicamente si ErbB2 actúa como coactivador transcripcional de Stat3 en la inducción de ciclina D1 por HRG. Células C4HD y T47D transfectadas con una construcción del promotor de ciclina D1-luciferasa y tratadas con HRG mostraron un aumento de la actividad transcripcional, que fue prevenido por la cotransfección con hErbB2DNLS. Por el contrario, la cotransfección con una mutante constitutivamente activa de ErbB2 y la sobreexpresión de ErbB2, incrementaron la actividad transcripcional. Por último, observamos una fuerte disminución de la proliferación mediada por HRG en células C4HD reconstituidas con hErbB2DNLS. Estos resultados sugieren que el complejo nuclear Stat3/ErbB2 promueve la proliferación de células de cáncer de mama inducida por HRG, mediante un mecanismo en el cual ErbB2 actúa como coactivador de Stat3.