LAS CELULAS DE MULLER Y EL ACIDO DOCOSAHEXAENOICO PROMUEVEN EL MANTENIMIENTO DE NEUROBLASTOS Y SU DIFERENCIACION EN FOTORRECEPTORES DE RETINA

SIMÓN M. VICTORIA; ROTSTEIN, NORA; POLITI, LUIS

Congreso; V Congreso de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2008

Introducción: Las enfermedades neurodegenerativas de la retina se caracterizan por la muerte generalizada de fotorreceptores (FRs). Recientemente se ha propuesto que las células gliales de Müller jugarían un rol importante en la regeneración de la retina. Sin embargo, se desconocen los factores que promueven su proliferación y diferenciación en FRs. Objetivos: Identificar factores celulares y moleculares que promueven  la generación y mantenimiento de neuroblastos (NB) y la expresión de marcadores de FRs. Metodología: Cultivos secundarios obtenidos de cultivos gliales o neuonales puros, o de cocultivos neurogliales de retina de rata se incubaron en medios suplementados o no con suero o ácido docosahexaenoico (DHA), ácido graso poliinsaturado que promueve la supervivencia de FRs. Una vez fijados,  se determinó la presencia de marcadores de células progenitoras (Nestina e incorporación de BrdU) y la expresión de marcadores de FRs (opsina y Crx). Resultados: En subcultivos  provenientes de cultivos gliales puros no se observaron NB ni marcadores de FRs, mientras que los cultivos neuronales puros no sobrevivieron al repique. Sin embargo, en los pasajes de cocultivos neuro-gliales se observó que un 30% de las células fueron Crx positivas, aumentando a más del 60% con el agregado de DHA. Alrededor del 1% fueron NB que incorporaron BrdU; expresaron Nestina; o co-expresaron BrdU y Crx, indicando que se generaron por mitosis en los subcultivos para luego diferenciarse como FRs. El agregado de DHA redujo un 50% la muerte celular en los pasajes, aumentó 30% el número de células BrdU positivas que  co-expresaron Crx  y promovió el desarrollo de axones. Discusión: Estos resultados sugieren que la interacción neuro-glial es clave en el mantenimiento y/o generación de NB en los cultivos secundarios, y que el DHA permitiría su supervivencia y posterior  diferenciación en FRs.