ROL DE LA FOSFORILACIÓN DE PROTEÍNAS Y ACCIÓN DE LA ERITROPOYETINA EN LA MUERTE PROGRAMADA DEL ERITROCITO

VOTA, D; MALTANERI, R; NESSE, A; VITTORI, D

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica,; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica,

Previamente demostramos diferencias entre los mecanismos de eriptosis inducida por estrés oxidativo (H2O2+NaNO2) o aumento de calcio por ionóforo A23187 (ICa) en glóbulos rojos (GR). La observación de banda 3 fosforilada, sólo en el primer modelo, indujo a estudiar el rol de kinasas y fosfatasas (citometría de flujo y Western blotting). Un aumento de la actividad de la fosfatasa asociada a banda 3, PTP1B en presencia de ICa (C 63±4; H2O2+NaNO2 55±4; ICa 96±2 UA; P 0,05, n=3), explica la ausencia de fosforilación de banda 3 en GR incubados con A23187/Ca2+. La actividad aumentada de PTP1B sería inducida por calpaína, a su vez activada por el incremento de calcio celular, ya que, la inhibición de calpaína por calpastatina previno el aumento de actividad de la fosfatasa. En ambos modelos, la traslocación de fosfatidilserina (PS) disminuyó por inhibición de PI3K y aumentó por inhibición de fosfatasas en forma significativa. Entre éstas, se demostró la participación de PTP1B por aumento de exposición de PS en ensayos de inhibición específica (CinnGel) (C 3±0,6; H2O2+NaNO2 19±2,0; Cin-H2O2+NaNO2 32±4,0; ICa 29±0,3 Cin-ICa 41±5,0%; P<0,05, n=3). Se ha reportado que la eritropoyetina (Epo) podría tener un efecto directo sobre GR en ciertas patologías. La presencia de Epo previno completamente el aumento de ROS (C 266±43; H2O2+NaNO2 535±561; Epo-H2O2+NaNO2 263±55 UA; P<0,05, n=6) y, parcialmente, el de lipoperoxidación, inducidos por agentes oxidantes. En los dos modelos, Epo indujo aumento del calcio intracelular y no impidió la traslocación de PS. En conclusión, se destaca el rol del desbalance de fosforilación de proteínas en la señalización de eriptosis y la ausencia de fosforilación de banda 3 en el modelo ICa, asociada al aumento de actividad de PTP1B. El incremento de calcio celular en presencia de Epo explicaría la incapacidad para prevenir la traslocación de PS, aunque, su acción antioxidante podría disminuir el estrés oxidativo generado en diferentes patologías.