EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN EXTRACELULAR DE HIERRO SOBRE LOS MECANISMOS QUE MEDIAN SU CAPTACIÓN EN CÉLULAS K562

PÉREZ GLADYS; VITTORI DANIELA; PREGI NICOLÁS; GARBOSSA GRACIELA; NESSE ALCIRA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Han sido descriptos dos tipos de mecanismos que median la incorporación de hierro (Fe). Por un lado, receptores específicos para la captación del metal unido a transferrina: RTf y RTf2. Por otro, una vía alternativa para el Fe presente en la forma de complejos de bajo peso molecular, en la que intervienen proteínas como el transportador de metales divalentes DMT1. El objetivo fue estudiar el efecto de la disponibilidad de Fe sobre la regulación de los distintos mecanismos de captación del metal. Se emplearon células de la línea humana K562 que expresan RTf, RTf2 y DMT1. Metodología empleada: cultivos bajo condiciones de exceso o depleción de Fe; evaluación de la expresión de RTf y RTf2 a nivel de ARNm (RT-PCR) y de proteína (inmunoblotting) y determinación de la velocidad de incorporación de 59Fe. Mientras que el exceso de Fe regula negativamente la expresión del RTf, el tratamiento con el quelante desferrioxamina (Df) indujo aumento en los niveles de ARNm del RTf pero no del RTf2. Los resultados obtenidos para el RTf fueron corroborados por inmunoblotting. Luego de 24 h de cultivo bajo distintas condiciones de disponibilidad de Fe, la captación del radioisótopo por la vía alternativa sólo fue modificada en presencia de exceso del metal (C: 2110/1610-2830; Df: 1780/1730-2250; Fe: 37000/30500-44100 cpm; n=3 P<0,01). Este efecto fue dependiente de la concentración extracelular de Fe y se manifestó en un rápido aumento de la velocidad de incorporación de 59Fe (pulso de 2 h) por el agregado de Fe no marcado (C: 0,049/0,035-0,058; Fe 20 mM: 0,112/0,070-0,160; Fe 200 mM: 2,836/1,742-4,016 ng Fe/106 cél/h; n=4 P<0,05).Los resultados apoyan la hipótesis que atribuye a cada mecanismo diferente función biológica. Mientras que la vía mediada por RTf participa en la incorporación del Fe necesario para cubrir las necesidades metabólicas, la alternativa desempeñaría un rol en el proceso de detoxificación, eliminando del medio las moléculas del metal potencialmente tóxicas.