INVESTIGADORES
VITTORI Daniela Cecilia
congresos y reuniones científicas
Título:
ACCIÓN DE TNF-ALFA SOBRE CÉLULAS EN ETAPA DE DIFERENCIACIÓN ERITROIDE
Autor/es:
VITTORI DANIELA; PÉREZ GLADYS; VOTA DAIANA; NESSE ALCIRA
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; 50 Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La
producción incrementada de citoquinas inflamatorias cumpliría un rol
inhibitorio sobre la supervivencia de progenitores eritroides en la anemia de
la enfermedad crónica. Para investigar la apoptosis mediada por receptores de
muerte durante el proceso de diferenciación eritroide, se estudió el efecto de
TNF-alfa (T) sobre las líneas celulares UT-7 (dependiente de eritropoyetina, E)
y K562. En ambas, la diferenciación inducida por hemina (H) alcanzó valores de
86% de células hemoglobinizadas (DAF) y no afectó la viabilidad ni la
proliferación celular. El T no indujo apoptosis sobre las células no
diferenciadas. El tratamiento con H sensibilizó a las células K562 al efecto
apoptótico de T (Hoechst) (H-T 37,6±3,0%; H 4,7±0,5%; P<0,002), el cual fue
incrementado por la inhibición de PI3K con Ly294002 (H-T-Ly 67,8±2,4%; H-Ly
14,2±6,5%; P<0,05). La acción de T fue confirmada por neutralización con
anti-T. En células UT-7 cultivadas con E e inducidas a diferenciación con H,
sólo se observó apoptosis debida a T en presencia de Ly, la cual fue significativamente
mayor a la debida a la inactivación de la señalización de E vía PI3K (E-H-Ly-T
92,2±2,4%; E-H-Ly 68,9±5,3%; P<0,01). Los niveles de ARNm (RT-PCR) del
factor antiapoptótico Bcl-x no se modificaron por ninguno de los tratamientos
de las líneas celulares. Los niveles de ARNm de c-FLIP, proteína supresora de
señales apoptóticas inducidas por receptores de muerte, disminuyeron en células
K562 diferenciadas, pero no en UT-7.Células
con distinta dependencia de factores de crecimiento muestran diferente
sensibilidad al efecto de citoquinas proinflamatorias bajo las mismas
condiciones de diferenciación eritroide. La acción negativa de TNF-alfa sobre
células K562 podría explicarse por la disminución de c-FLIP inducida durante la
diferenciación eritroide, ya que no se observó apoptosis en células UT-7 con
niveles inalterados de c-FLIP. Los mecanismos de protección celular frente a la
acción de TNF-alfa estarían mediados por caminos de señalización vía PI3K y
serían independientes de Bcl-x.