Caracterización de eventos relacionados a la capacitación y patrones de movilidad de espermatozoides humanos incubados en ausencia de nutrientes exógenos

OSCOZ-SUSINO, NATALIA; LUQUE GM; SIERRA, JESSICA M.; MONDILLO, CAROLINA; KRAPF, DARÍO; VISCONTI, PABLO; BUFFONE MG; MARIN BRIGGILER, CI

Jornada; XXIV Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología (SAB); 2022

Sociedad Argentina de Biología

CARACTERIZACIÓN DE EVENTOS RELACIONADOS A LA CAPACITACIÓN Y PATRONES DE MOVILIDAD DE ESPERMATOZOIDES HUMANOS INCUBADOS EN AUSENCIA DE NUTRIENTES EXÓGENOSOscoz-Susino N1, Luque GM1, Sierra JM1, Mondillo C1, Krapf D2, Visconti PE3, Buffone MG1, Marín Briggiler CI1. 1IBYME-CONICET, Buenos Aires, Argentina. 2IBR-CONICET, Rosario, Argentina. 3Department of Veterinary and Animal Science, University of Massachusetts, Amherst, MA, USA. E-mail: natioscozita@gmail.comLa capacitación comprende una serie de cambios metabólicos, bioquímicos y estructurales fundamentales para que el espermatozoide logre fecundar a un ovocito. Si bien se sabe que la adquisición de la capacidad fecundante espermática in vitro requiere de glucosa, piruvato y lactato en los medios de cultivo, poco se conoce sobre los eventos moleculares y las características de la movilidad en espermatozoides incubados en ausencia de estos nutrientes exógenos. El objetivo de nuestro trabajo fue comparar los distintos eventos relacionados a la capacitación y los patrones de la movilidad espermática en presencia o ausencia de sustratos energéticos. Los espermatozoides provenientes de donantes sanos fueron incubados por 4 h en medio BWW conteniendo glucosa (5,5 mM), piruvato (0,27 mM) y lactato (25 mM) (llamado NUTR, por nutrientes) o depletado de los mismos (STRV, por starving o hambreado). Se analizaron el contenido de ATP mediante luminiscencia (kit de Cayman Chemical), los niveles de AMPc por radioinmunoensayo, de Calcio (Ca2+) intracelular por citometría de flujo y las fosforilaciones proteicas por Western blot. Además se evaluaron parámetros de la movilidad mediante un análisis computarizado basado en el seguimiento del desplazamiento de la cabeza (SCA, Microptic), un sistema de análisis de parámetros flagelares (FAST, Gallagher et al, 2019) y un registro de las trayectorias en 3 dimensiones (3D) (van der Horst, 2020). Los resultados mostraron que en el medio STRV se obtuvieron niveles de ATP, de AMPc y de fosforilación en sustratos tirosina significativamente menores que en el medio NUTR (p