La sobre-expresión del bromodominio 3 de T. cruzi afecta su diferenciación e infectividad y disminuye su sensibilidad a inhibidores de bromodominios

ALONSO, VICTORIA LUCÍA; RITAGLIATI, CARLA; CRIBB, PAMELA; SERRA, ESTEBAN

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología

El factor Bromodominio 3 de Trypanosoma cruzi (TcBDF3) es una proteína con un bromodominio en su extremo N-terminal. Este dominio tiene la capacidad de unir lisinas acetiladas y representa un módulo evolutivamente conservado presente casi exclusivamente en proteínas de localización nuclear. En trabajos previos, mediante inmunofluorescencia y microscopía electrónica determinamos que TcBDF3 en amastigotes y epimastigotes se localiza en todo el cuerpo celular del parásito observándose más intensamente marcada la región del bolsillo flagelar y el flagelo. En tripomastigotes la localización cambia totalmente y observamos a TcBDF3 solo en el flagelo. Además, demostramos que esta proteína interacciona con tubulina α acetilada presente en el citoesqueleto y flagelo de T. cruzi. Para estudiar la función de esta proteína en T. cruzi se diseñó una versión de TcBDF3 doble mutante la cual es incapaz de interaccionar con péptidos de tubulina acetilada. Al sobre-expresar en epimastigotes de manera inducible esta doble mutante puntual observamos una disminución en la tasa de crecimiento de epimastigotes así como una disminución marcada en las tasas de metaciclogénesis. Al realizar ensayos de infección en células Vero observamos diferentes fenotipos al sobre-expresar la versión salvaje y la doble mutante. Previamente determinamos que existen inhibidores de bromodominios, desarrollados contra bromodominios humanos, que tienen un efecto deletéreo sobre los epimatigotes de la cepa Dm28c. Entonces, estudiamos el efecto estos inhibidores sobre los parásitos que sobre-expresan TcBDF3 y observamos una recuperación del crecimiento al comprar con los parásitos salvajes. Estos resultados permiten concluir que TcBDF3 está involucrado en el proceso de diferenciación e infección en T. cruzi y que los bromodominios podrían ser un blanco quimioterapéutico atractivo contra la Enfermedad de Chagas.