INVESTIGADORES
CRIBB Pamela
congresos y reuniones científicas
Título:
Transcripción de la ARN polimerasa III en Trypanosoma cruzi: el complejo de inicio
Autor/es:
TROCHINE ANDREA; CRIBB PAMELA; ESTEBAN SERRA
Lugar:
Mendoza, Argentina
Reunión:
Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoologia y Enfermedades Parasitarias; 2005
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
Transcripción de la ARN polimerasa III en Trypanosoma cruzi: el complejo de
inicio
Trochine A, Cribb P, Serra E
atrochine@yahoo.com.ar
La ARN polimerasa III (ARNPIII) está encargada de la transcripción de ARNs
pequeños, entre ellos los ARNt, el 5S ARNr, U6 snARN y otros ARNs pequeños. La
ARNPIII necesita de un conjunto de factores de inicio para unirse a los promotores y
comenzar la transcripción. Entre ellos TFIIIA, TFIIIB, TFIIIC y SNAPc. En
tripanosomas trabajos recientes muestran que hay factores de inicio de la ARNPIII
conservados. El factor PBP-1 que interacciona con el promotor del SL, está conformado
por tres subunidades, una de las cuales es ortóloga a una subunidad de SNAPc. Además,
se ha demostrado que la TBP de Trypanosoma brucei (TRF4) es esencial en la
transcripción por las tres ARNP, y que interacciona con los promotores de las
prociclinas (ARNPI); SL RNA (ARNPII); y U-snRNA y 7SLRNA (ARNPIII). Además
TRF4 interacciona in vivo con el homólogo a BRF1 de tripanosomas, un componente
del complejo TFIIIB.
En nuestro laboratorio utilizamos como modelo de estudio al agente causal del mal de
Chagas Trypanosoma cruzi. Hemos identificado en su genoma secuencias
correspondientes a posibles ortólogos de factores de inicio de la ARNPIII: homólogos a
los tres componentes del complejo TFIIIB (TBP, BRF y Bdp), a dos componentes del
complejo TFIIIC (Tfc4, Tfc1), entre otros. Sus secuencias codificantes se clonaron en
múltiples vectores, entre ellos vectores para doble híbrido en levaduras y de expresión
en el parásito. Los ensayos de doble híbrido muestran una fuerte interacción entre
TcTBP y TcBRF. Además demostramos por western blot que TcBRF se encuentra en
fracciones nucleares, en parásitos sincronizados a lo largo del ciclo celular. Por último,
utilizando la metodología de TAP-tag detectamos varias proteínas que formarían
complejos con TcBRF, las que se identificarán próximamente por espectrometría de
masa.