IDENTIFICACIÓN DE INHIBIDORES DE LA NUCLEÓSIDO DIFOSFATO QUINASA 1 CON ACTIVIDAD TRIPANOCIDA EN Trypanosoma cruzi

FACUNDO GALCERAN; FABIO DIGIROLAMO; MELISA SAYÉ; CHANTAL REIGADA; MARCOS RENGIFO; BELEN MACIEL; CLAUDIO A. PEREIRA; MARIANA R. MIRANDA

Congreso; XXXIII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

El nucleósido difosfato quinasas (NDPKs) participan en la homeostasis intracelular de nucleótidos; son consideradas multifuncionales ya que están involucradas en numerosos procesos claves para la supervivencia de las células. La TcNDPK1 es una isoforma presente en Trypanosoma cruzi, que además de ser multifuncional, en los tripanosomátidos cumple un rol central en el metabolismo de nucleótidos y reciclado de purinas dado que estos organismos carecen de síntesis de purinas de novo. Esta diferencia respecto del hospedador mamífero hace que las NDPKs sean atractivos blancos moleculares. En el presente trabajo iniciamos una búsqueda de inhibidores de la TcNDPK1 mediante estrategias computacionales de reposicionamiento de drogas. Utilizando diferentes bases de datos conteniendo 12,000compuestos aprobados para humanos, realizamos una búsqueda por similitud de ligando partiendo de inhibidores conocidos reportados en la bibliografía y, a la vez, aplicamos la técnica de docking molecular basada en el receptor, empleando la estructura tridimensional de la TcNDPK1 y modelos derivados de la misma. De ambas búsquedas obtuvimos más de 50 compuestos prometedores de los cuales el nebivolol y el telmisartán fueron evaluados. El nebivolol tuvo mayor actividad tripanocida sobre epimastigotes, trypomastigotes y estadíos intracelulares (IC50epis =19 µM, IC50trypos= 5.8 µM,IC50 liberacion/trypos=2.2 µM), pero menor efecto inhibitorio de la actividad enzimática (IC50NDPK =1mM). Por su parte, el telmisartán tuvo un efecto menor sobre los parásitos (IC50epis =57 µM, IC50trypos= 44 µM,IC50liberacion/trypos=15 µM), pero mayor sobre la actividad enzimática (IC50NDPK = 192µM). Las IC50 calculadas sobre epimastigotes transgénicos que sobre-expresan la TcNDPK1sugieren que la enzima es blanco de los compuestos. Sin embargo, los resultados obtenidos indican que existirían también otros blancos posibles. Los estudios continúan en curso.