Aislamiento y selección de bacterias rizosféricas con actividad antagonista frente Verticillium dahliae

SAYAGO, P; ALBARRACIN ORIO, A.G.; BRÜCHER, E; PALACIOS, S.; DUCASSE, D.A.

Santa Fe

Congreso; XV Jornadas Fitosanitarias; 2015

El cultivo del olivo, que ha experimentado una gran expansión en la Argentina durante la última década, se ve afectado por la ?marchitez? o ?parálisis parcial?, una enfermedad limitante cuyo agente causal es el hongo de suelo Verticillium dahliae Kleb. El aislamiento e identificación de rizobacterias promotoras del crecimiento de plantas (PGPR, plant growth promoting rhizobacteria) que presentan actividad antagonista a patógenos fúngicos es una alternativa ecológica para proteger las plantas. Por esta razón decidimos abordar el control biológico como una estrategia sustentable para el manejo de la enfermedad.Para el aislamiento e identificación de las potenciales PGPR antagonistas de V. dahliae, se tomaron muestras de suelo de olivares de la provincia de Catamarca, Argentina. La cepa V. dahliae utilizada se caracterizó como patotipo no-defoliante, el más frecuente en nuestro país.Se sometió 1 gr. de suelo a agitación en solución salina esterilizada (1%) durante 20 min y con la suspesión obtenida se efectuaron diluciones seriada que fueron sembradas en placas de Petri con medio LB. Las mismas fueron incubadas a 28 ± 2 °C durante 2 días seleccionando colonias puras. La actividad antagónica de las cepas bacterianas contra V. dahliae se evaluó en ensayos de co-cultivo. Para ello, se tomaron discos de medio con micelio de V. dahliae de 10mm de diámetro, obtenidos de un cultivo de 14 días y se colocaron en el centro de una placa de Petri conteniendo medio Agar Papa Glucosado (APG). Cultivos de cada bacteria a evaluar se sembraron en estrías a cada lado del disco fúngico. Las placas se incubaron a 28 ± 2°C por 10-15 días. Como control, se utilizó placas que sólo contenía el disco micelial. Luego de la incubación, se midió el crecimiento radial del patógeno en las placas duales. El porcentaje de inhibición con respecto al control se calculó de acuerdo a la fórmula: I = (C-T / C) x 100, donde: I = % de inhibición, C = crecimiento del micelio en el control, T = crecimiento del micelio en el tratamiento. Se detectaron cepas con porcentajes de inhibición del crecimiento de V. dahliae que oscilaron entre el 27 y el 50% y se observaron alteraciones morfológicas del micelio fúngico cuando éste crecía en placas de co-cultivo. Se han seleccionado bacterias con actividad antagonista contra V. dahliae y en todos los casos, los aislamientos fueron recuperados de los suelos muestreados en una región con alta prevalencia de V. dahliae.