INTERACCIÓN ENTRE EL REGULADOR MASTER DEL VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO E2 Y P53 EN EL CONTEXTO DE SE- PARACIÓN DE FASES LÍQUIDO-LÍQUIDO

SILVIA BORKOSKY ; ANDRES H. ROSSI; CARLA A. PASCUALE; GONZALO PRAT GAY

Congreso; XIII CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA 2021; 2021

Sociedad Argentina de Virología

El fenómeno de separación de fases líquido-líquido (LLPS) rige la condensación de macromoléculas, descripta en las denominadas organelas sin membranas, donde transiciones de estados líquidos a sólidos impactan en una amplia gama de procesos fisiológicos y patológicos. Si bien se sabe que el ensamblaje de fábricas virales de varios virus a RNA es regulado por LLPS, hay poca evidencia sobre este mecanismo en la replicación de virus a DNA. En el contexto de infección y cáncer gatillado por el Virus del Papiloma Humano (HPV), se ha demostraron que p53 interactúa con el regulador maestro de replicación y transcripción viral, E2. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar en profundidad la interacción entre ambas proteínas, indagando puntualmente en la formación de condensados biomoleculares regidos por LLPS. A través de ensayos espectroscópicos combinados con microscopías de fluorescencia y confocal, demostramos que p53 y el dominio C-terminal de E2 (E2C) forman condensados líquidos esféricos con propiedades de LLPS. p53 sola también forma condensados esféricos pequeños pero éstos evolucionan rápidamente a agregados tipo amiloide; mientras que los condensados heterotípicos de ambas proteínas conservan su morfología esférica durante largos períodos de tiempo. Evaluamos, además, la participación de DNAs específicos e inespecíficos tanto en condensados homotípicos como heterotípicos, demostrando que en presencia de ambos tipos de DNA se forman condensados irregulares. Por último, a través de ensayos celulares, confirmamos in vivo la interacción entre E2 y p53, evidenciando co-localización de ambas proteínas y la formación de condenados granulares en asociación a la cromatina. Los resultados del presente trabajo sugieren que el complejo p53-E2 estaría implicado en aspectos desconocidos de infección y cáncer asociados a HPV y que p53 podría modular la replicación de HPV a través de mecanismos de LLPS.