Análisis histológico y funcional de poblaciones linfocitarias amigdalinas.

PASTOR ROCIO; PUYSSEGUR JULIANA; BILLORDO ARIEL; COLLADO, MARÍA SOLEDAD

Buenos Aires

Jornada; Jornadas de Incentivo a las Vocaciones Científicas,; 2022

INIGEM

Análisis histológico y funcional de poblaciones linfocitarias amigdalinas.- Objetivo:Caracterizar la localización de linfocitos B (LB) y linfocitos T (CD4+ y CD8+) en tejido amigdalino y su respuesta funcional al cultivo ex vivo. Asimismo, evaluamos la coexpresión de CD39 y CD73 en LB, ectoenzimas anti-inflamatorias. Finalmente, observamos el comportamiento de CD73 en las poblaciones linfocitarias proliferantes (efectoras).- Métodos:Se utilizaron células mononucleares aisladas de amígdalas extirpadas quirúrgicamente de niños y adolescentes, analizadas en fresco y post-cultivo mediante citometría de flujo (FACS). Además se realizaron inmunohistoquímicas en cortes parafinados de las muestras.- Resultados:En las inmunohistoquímicas observamos que el tejido amigdalino presenta mayoritariamente LB tanto en el compartimento linfoide folicular como epitelial. Se evaluó la expresión de CXCR5 como indicador de localización folicular. Observamos tres intensidades para los LT CD4+ (nula, intermedia y alta) correspondientes a la zona interfolicular, manto del folículo y centro germinal respectivamente. Para LT CD8+ el patrón de tinción corresponde a su localización en zona del manto o zona interfolicular.Los linfocitos Ki-67+ (proliferantes) los identificamos en folículos linfoides. Por FACSobservamos tanto disminución en el porcentaje de LB de centro germinal como aumento delporcentaje de LB CD73+CD39+con el aumento de la edad.Post cultivo comprobamos que los LB, LTCD4+ y LTCD8+ proliferan al ser estimulados con IL2, IL4, CpG y CD40-L, y reportamos que las células Ki-67+ no expresan CD73.- Conclusiones:Comprobamos que las tres poblaciones proliferan en cultivo ex vivo. Demostramos el aumento de la subpoblación LB CD39+CD73+ con la edad, capaz de convertir el ATP en adenosina (supresora de la respuesta inflamatoria). Más aun, las células proliferativas no expresan CD73. Comprobamos el patrón de localización esperado para LT CD4+ (extrafolicular, manto y centro germinal) y demostramos la presencia de LT CD8+ en los folículos amigdalinos.