Actividad antiinflamatoria e identificación de moléculas aisladas de Caesalpinia Paraguariensis

SGARIGLIA, M. A.; SOBERÓN, J.R.; SAMPIETRO, D.A.; VATTUONE, M. A.

Tafi del Valle

Congreso; XXVII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2010

Asociación de biología de Tucumán

Introducción: En trabajos anteriores se probó la actividad antiinflamatoria de infusión de ritidoma de C. paraguariensis por el ensayo de inhibición de hialuronidasa. Se logró concentrar la actividad por fraccionamientos bioguiados del extracto obteniéndose FAI (fracción antiinflamatoria). Objetivos: aislar los componentes bioactivos de FAI, ensayar la actividad inhibitoria de hialuronidasa, e identificar estructuralmente las moléculas bioactivas. Metodología: FAI fue analizada por HPLC-C18; fase móvil: A = agua, 0,1% ác. Fórmico; B= ACN:H2O, 1:1, 0,1% ác. Fórmico; gradiente (min): t = 0, 0%B, t=35, 100% B; t=38, 100%B); flujo 0,7 ml/min y detección a 254 nm. La actividad inhibitoria de hialuronidasa se ensayó por el método de Morgan-Elson modificado por Reissig. La identificación se realizó por técnicas espectroscópicas (UV-VIS, espectrometría de masas con ionización por electrospray (EM-ESI) y RMN-1H). Resultados: se aislaron dos eluatos a partir de FAI (M25 y M29), éstos presentaron actividad inhibitoria de hialuronidasa, expresada como concentración inhibitoria (microg/ml) 50% (CI50): FAI 11,1±1,5, M25 1,5±0,1 y M29 2,3±0,1. Los análisis espectrales permitieron identificarlos: M25=Acido elágico: EM-ESI: (M-H) a masa/carga (m/z) 301,14; (M+H)+ m/z 303,14; (M+Na)+ m/z 325,22. Masa Exacta: 302,1480 unidades de masa atómica (u). Composición molecular: C14H6O8 con 12 insaturaciones. 500,12 MHz RMN-1H en dimetilsulfóxido deuterado (DMSO-d6) delta H (ppm): H 5,5 7,51 (s, 2H). Espectro UV: lamda max (MeOH) nm (épsilon): 255 (39,79), 358,0 (9,182). M29 = Acido 3-O-metilelágico: EM-ESI: (M+H)+  m/z 317,02; (M-H) m/z 315,01; (N-Me) m/z 300,9 .Masa Exacta: 316,01 u. Composición molecular: C15H8O8 con 12 insaturaciones. 500,12 MHz RMN-1H en DMSO-d6 epsilon H (ppm); H5 7,51 (s, 1H), H5 7,48 (s, 1H), 3-OCH3 4,06 (s, 3H). Espectro UV: lambda máx (MeOH) nm (épsilon): 249,9 nm (25,6), 346sh, 367,2 nm (8.4). Conclusiones: se lograron aislar, por procedimientos bioguiados, dos componentes bioactivos potencialmente antiinflamatorios de infusión de ritidoma de C. paraguariensis. Estos compuestos se identificaron como ácido elágico y ác. 3-O-metilelágico.