FOSFOMICINA PROTEGE A LOS MONOCITOS Y MACRÓFAGOS SANGUÍNEOS PORCINOS DEL DAÑO CELULAR INDUCIDO POR UNA MICOTOXINA

PÉREZ GAUDIO, DENISA, PÉREZ, SANDRA, MOZO, JOAQUÍN, MARTÍNEZ, GUADALUPE, DECUNDO, JULIETA, ROMANELLI, AGUSTINA, DIEGUEZ, SUSANA, SORACI, ALEJANDRO

Tandil

Jornada; Jornadas de Investigación y Posgrado. El desafío de visibilizar la ciencia.; 2022

FCV-UNCPBA

El destete es un período estresante para el lechón. Junto con su nueva dieta podrán estar expuestos a micotoxinas como el deoxinivalenol (DON) que inhibe la síntesis proteica e induce daño en el ADN y apoptosis. Además, en este período son muy frecuentes las diarreas de origen infeccioso por lo que podrán quedar expuestos a los antibióticos utilizados para su tratamiento. Entre ellos se encuentra la fosfomicina (FOS) la cual posee además propiedades extra-antibióticas. Hemos encontrado que DON induce cambios morfológicos nucleares compatibles con apoptosis (CMNCA) en cultivos celulares de origen humano, bovino y murino y que FOS es capaz de prevenir dichos cambios en todas las líneas celulares ensayadas. El objetivo de este trabajo fue determinar el %CMNCA inducido por DON en monocitos-macrófagos porcinos y evaluar el rol protector de FOS. Se tomaron muestras de sangre con citrato de sodio como anticoagulante a 4 lechones post-destete. Se centrifugaron 15 min. a 2500 rpm, se obtuvieron las capas blancas, se transfirieron a tubos con ClNH4 y se centrifugaron durante 7 min. a 3000 rpm y 4ºC. Se descartó el sobrenadante, se realizó un lavado con PBS y se centrifugaron nuevamente. Las capas blancas se resuspendieron y se sembraron en placas de 6 pocillos conteniendo RPMI y 20% de SFB. A las 24 h se sembraron en placas de 24 pocillos conteniendo cubreobjetos para adherencia. Luego de 24 h, las monocapas fueron tratadas, por triplicado, de la siguiente manera: a) DON: 2,8 μg/mL; b) FOS: Sal disódica, 150 μg/mL; c) DON+FOS: DON 2,8 μg/mL y FOS 150 μg/mL y d) Control negativo: Células con medio de cultivo. Luego de 4 h, el medio fue removido, las células fueron lavadas con PBS, fijadas con paraformaldehído al 1 % y teñidas con DAPI para evaluar los CMNCA. Fueron observadas bajo microscopio de fluorescencia y se obtuvieron registros fotográficos mediante cámara acoplada. Utilizando el macro de apoptosis del software FIJI® se calculó el %CMNCA. Existieron diferencias estadísticamente significativas (p