EFECTO ANTIINFLAMATORIO DE NANOVESICULAS ARQUEOLIPÍDICAS SOBRE CÉLULAS ENDOTELIALES HUMANAS

CHARÓ N L,; JEREZ, HORACIO; TATTI, SILVIO; ROMERO, EDER LILIA; SCHATTNER, M.

Congreso; XIV Congreso Argentino de Hemostasia y Trombosis (CAHT) 2021.; 2021

Introducción: Los nanoarqueosomas (ARQ) son nanovesiculas (NVs) preparadas con lípidos de arquebacterias. Recientemente, nuestro grupo reportó el diseño de nuevos ARQ preparados a partir de una cepa hiperhalofila aislada de la Patagonia Argentina. Notablemente, dichos ARQ actuaron como antiinflamatorios sobre macrófagos, o induciendo su muerte apoptótica, simplemente reemplazando el colesterol de su bicapa, por alendronato en su espacio acuoso, respectivamente. A diferencia de los liposomas, además de ser extensamente endocitados por macrófagos, los ARQ son refractarios a ambientes fisicoquímica y enzimáticamente hostiles, pudiendo nebulizarse, administrarse oral o parenteralmente. Sin embargo, hasta el momento su efecto sobre endotelio vascular humano-datos cruciales para su ingreso en la clínica- es desconocido. Objetivo: Analizar el efecto de ARQ en células endoteliales de vena umbilical humana (HUVECs) y compararlo con liposomas (HSPC).Metodología: La estructura de NVs se determinó mediante dispersión de luz (dinámica y de análisis de fases). Las HUVECs se estimularon o no con lipopolisacárido (LPS:1ug/ml), Pam3CysSerLys4 (Pam3CSK4:1ug/ml), E.coli (MOI:0.01) o factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α:0.3ng/ml) en ausencia o presencia de NVs. Se analizó viabilidad celular y apoptosis (microscopía y citometria de flujo); expresión de ICAM-1 y E-selectina (citometria), secreción de IL-6 y del factor de Von Willebrand (FvW) (ELISA) y captación de NVs (citometria y microscopia confocal). Los datos se analizaron por ANOVA de una vía, post-test Bonferroni (p