INTERACCIÓN ENTRE EL REGULADOR MASTER DEL VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO E2 Y P53 EN EL CONTEXTO DE SEPARACIÓN DE FASES LÍQUIDO-LÍQUIDO

BORKOSKY, SILVIA S.; MARISOL FASSOLARI; CAMPOS-LEÓN, KAREN; ANDRÉS HUGO ROSSI; CARLA PASCUALE; KEVIN GASTON

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virología; 2021

Sociedad Argentina de Virología

El fenómeno de separación de faseslíquido-líquido (LLPS) rige la condensación de macromoléculas, descripta en lasdenominadas organelas sin membranas, donde transiciones de estados líquidos asólidos impactan en una amplia gama de procesos fisiológicos y patológicos. Sibien se sabe que el ensamblaje de fábricas virales de varios virus a RNA es reguladopor LLPS, hay poca evidencia sobre este mecanismo en la replicación de virus aDNA. En el contexto de infección y cáncergatillado por el Virus del Papiloma Humano (HPV), se ha demostraron que p53interactúa con el regulador maestro de replicación y transcripción viral, E2. Elobjetivo del presente trabajo fue caracterizar en profundidad la interacciónentre ambas proteínas, indagando puntualmente en la formación de condensadosbiomoleculares regidos por LLPS. A través de ensayos espectroscópicoscombinados con microscopías de fluorescencia y confocal, demostramos que p53 yel dominio C terminal de E2 (E2C) forman condensados líquidos esféricos con propiedadesde LLPS. p53 sola también forma condensados esféricos pequeños pero éstosevolucionan rápidamente a agregados tipo amiloide; mientras que los condensadosheterotípicos de ambas proteínas conservan su morfología esférica durantelargos períodos de tiempo.  Evaluamos,además, la participación de DNAs específicos e inespecíficos tanto encondensados homotípicos como heterotípicos, demostrando que en presencia deambos tipos de DNA se forman condensados irregulares.  Por último, a través de ensayos celulares,confirmamos in vivo la interacciónentre E2 y p53, evidenciando co-localización de ambas proteínas y la formaciónde condenados granulares en asociación a la cromatina. Los resultados delpresente trabajo sugieren que el complejo p53-E2 estaría implicado en aspectosdesconocidos de infección y cáncer asociados a HPV y que p53 podría modular lareplicación de HPV a través de mecanismos de LLPS.<!-- /* Font Definitions */@font-face{font-family:Arial;panose-1:2 11 6 4 2 2 2 2 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:auto;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-536859905 -1073711037 9 0 511 0;}@font-face{font-family:Arial;panose-1:2 11 6 4 2 2 2 2 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:auto;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-536859905 -1073711037 9 0 511 0;}@font-face{font-family:Calibri;panose-1:2 15 5 2 2 2 4 3 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:auto;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-520092929 1073786111 9 0 415 0;} /* Style Definitions */p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal{mso-style-unhide:no;mso-style-qformat:yes;mso-style-parent:"";margin-top:0cm;margin-right:0cm;margin-bottom:8.0pt;margin-left:0cm;line-height:107%;mso-pagination:widow-orphan;font-size:11.0pt;font-family:Calibri;mso-ascii-font-family:Calibri;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin;mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;mso-ansi-language:EN-GB;mso-fareast-language:EN-US;}.MsoChpDefault{mso-style-type:export-only;mso-default-props:yes;font-size:11.0pt;mso-ansi-font-size:11.0pt;mso-bidi-font-size:11.0pt;font-family:Calibri;mso-ascii-font-family:Calibri;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin;mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;mso-ansi-language:EN-GB;mso-fareast-language:EN-US;}.MsoPapDefault{mso-style-type:export-only;margin-bottom:8.0pt;line-height:107%;}size:612.0pt 792.0pt;margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm;mso-header-margin:36.0pt;mso-footer-margin:36.0pt;mso-paper-source:0;}div.WordSection1{page:WordSection1;}