Estudios cinéticos de la Uroporfirinógeno decarboxilasa: su sitio activo y la acción del hexaclorobenceno

CHAUFAN G.,; CORVI M.,; ALDONATI C.,; SAN MARTÍN DE VIALE L. C.,; CÁRDENAS M. L.,; RÍOS DE MOLINA M. C.

Universidad Argentina de la Empresa (UADE)

Congreso; XXII Jornadas Interdiciplinarias de Toxicología; 2002

Asosiación Toxicológica Argentina

El ensayo de competición es un método cinético que permite determinar si dos reacciones ocurren en uno o en diferentes sitios activos y establecer si dos reacciones son catalizadas por la misma o diferentes enzimas. Aquí lo aplicamos al estudio de la Uroporfirinógeno decarboxilasa, en preparaciones hepáticas de ratas normales o intoxicadas con hexaclorobenceno (HCB). El objetivo fue determinar el número de sitios activos en la enzima normal y ver el efecto del HCB in vivo sobre éste.      Se realizaron curvas para elegir las concentraciones de referencia de los sustratos pentacarboxiporfirinógeno (PG) y uroporfirinógeno (UG). Las concentraciones usadas fueron 1,52 mM PG (1-p) y 3.21 mM UG (p) para la preparación normal y 4.15 mM PG (1-p) y 9.51 mM UG (p) para la preparación porfírica. En todos los casos v0 fue aprox. 2 nmoles de porfirinas/mg de proteína x 30 minutos.      Los gráficos de competición sugieren que en la enzima normal existiría un único sitio activo, en tanto que en la porfírica existirían al menos dos, con inhibición cruzada.