CITOPROTECCIÓN DE HO-1 Y ASOCIACIÓN CON MAPKS EN CÁNCER DE PRÓSTATA

GUERON G; CASTRONUOVO C; SACCA P; KOTLER M; VAZQUEZ E

Mar del Plata

Congreso; 50 Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2005

Las especies reactivas de oxígeno (ROS) disparan la activación de múltiples vías de señalización incluyendo el de MAPKs e inducen muerte en una amplia variedad de tipos celulares. La hemo oxigenasa 1 (HO-1) es una proteína inducida por estrés que confiere citoprotección contra el daño oxidativo y provee una función vital en el mantenimiento de la homeostasis. Sus funciones anti-inflamatorias y anti-apoptóticas son mediadas por MAPKs. El objetivo de este trabajo ha sido determinar el rol de p38 y JNK en la muerte celular inducida por H2O2 en cáncer de próstata y su relación con HO-1. Se utilizaron cultivos de células PC3 expuestos a H2O2 (200 μM) durante 1.30h y posterior tratamiento con hemina (20uM) durante 22h. Se midió la expresión de p-p38, p-JNK y HO-1 por Western Blot. La viabilidad celular fue determinada por exclusión de Azul de Trypan y el ensayo de MTT. El estrés oxidativo fue evaluado por tinción con diclorodihidrofluoresceína diacetato (DCFA-DA, 25uM). El efecto del H2O2 sobre la viabilidad celular fue dosis y tiempo dependiente, observándose una disminución del 50% (p<0.05) con una concentración de 200uM durante 1.30h. La hemina restauró parcialmente la viabilidad celular. La expresión de HO-1 se indujo significativamente por tratamiento con hemina tanto en células controles como pre-tratadas con H2O2. Por microscopía de fluorescencia se detectó un importante aumento en los niveles de ROS por tratamiento con H2O2 y una disminución concomitante en células tratadas con H2O2 y hemina, concordante con el aumento de HO1. La expresión de p-JNK disminuyó un 46% (p<0,05) en presencia de H2O2 y los niveles fueron completamente restaurados por la hemina. H2O2 indujo un 35% (p<0.05) la expresión de p38, mientras que la hemina no produjo ningún efecto. Las células tratadas solo con hemina no sufrieron modificaciones en la expresión de MAPKs. Estos resultados demuestran un efecto citoprotector mediado por HO1 y la participación de JNK y p38 en el estrés oxidativo inducido por H2O2 en cáncer de próstata.