Implementación de estudios de cito y genotoxicidad en dos líneas celulares humanas.

ANDRIOLI, NANCY; COALOVA, ISIS; CHAUFAN, GABRIELA

Taller; 3er taller de métodos alternativos para la evaluación de productos fitosanitarios; 2021

La evaluación de riesgo genotóxico en humanos se vale de la implementación desistemas de pruebas en mamíferos. En una batería de ensayos las pruebas in vitropreceden a las in vivo evitando el uso de un número importante de animales, cuandolas primeras arrojan resultados negativos. En ese contexto, las líneas celulareshumanas son un recurso para la evaluación genotóxica, que presentan la ventaja detener origen en el blanco de interés. Dado que las respuestas en el contexto in vitrodifieren del contexto in vivo, se presenta el objetivo de estudiar las respuestas dediferentes líneas y las condiciones de ensayo óptimas en relación con el conocimientode variables como la duración del ciclo, el número de pasajes limitantes y el nivel deploidía. Las líneas humanas HEp-2 (larynx epidermoid carcinoma) y A549 (lungepithelial carcinoma) se utilizaron para la evaluación de citotoxicidad de Iprodione,Tebuconazol y formulaciones de Glifosato, de Cipermetrina. Los biomarcadoresanalizados incluyeron, citotoxicidad por MTT, índice de división nuclear, la frecuenciade micronúcleos y el estrés oxidativo a través de la actividad Superóxido dismutasa,Catalasa y Glutatión S-transferasa, niveles de glutation reducido y de proteínasoxidadas. Los resultados obtenidos indican que fue posible detectar la genotoxicidadde los agentes estudiados en ambas líneas celulares, encontrando el rango adecuadode respuesta óptima. Los patrones de respuesta citotóxica fueron similares paraambas líneas expuestas a los diferentes agroquímicos, pero difieren en la respuestagenotóxica y en los parámetros de estrés oxidativo mostrando mayor tolerancia lalínea A549 respecto de la HEp-2. Estos ensayos son parte de un proyecto deestandarización y caracterización de líneas celulares humanas para ensayosgenotoxicológicos en nuestro laboratorio que nos permiten dilucidar los diferentespatrones de respuesta en distintos sistemas celulares que están en línea con losprincipios de las 3R.