TERAPIA FOTODINÁMICA CON ACIDO 5-AMINOLEVÚLICO EN CULTIVOS TRIDIMENSIONALES DE CÉLULAS DE ADENOCARCINOMA DE PULMÓN

HAYDEE FUKUDA; MARÍA JULIETA TEIJO ; ROBERTO MEISS ; MARÍA DEL CARMEN MARTINEZ ; ALACIRA M DEL C BATLLE

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN (SAIC). REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGÍA (SAFIS); 2015

Sociedad argentina de Investigación Clinica

(583) TERAPIA FOTODINÁMICA CON ACIDO 5-AMINOLEVÚLICO EN CULTIVOS TRIDIMENSIONALES DECÉLULAS DE ADENOCARCINOMA DE PULMÓNHaydee Fukuda1; María Julieta Teijo1; Rp Meiss3; M Del CMartinez2; Am Del C Batlle1CIPYP-CONICET,UBA1 Departamento de Química Biologica, FCEN, UBA2 Instituto de Estudios Oncològicos,Academia Nacional de Medicina, Buenos Aires, Argentina3La Terapia fotodinámica (TFD) de tumores es un procedimiento terapéutico mínimamente invasivo de citotoxicidad selectiva hacia células malignas. La acción conjunta de un agentefotosensibilizante (FS) y luz genera una serie de reaccionesfotoquímicas que producen la muerte celular. La administración deácido 5-aminolevúlico (ALA), induce la acumulación de porfrinasfotoactivas. Sembrando 5x104 cél/ml (A549, adenocarcinoma depulmón humano) sobre agar 3%-RPMI (1:1) a los 7 días se obtuvieron esferoides multicelulares (EMCs) compactos (100-700 µm),modelo 3D útil para estudios independiente de la vasculatura.Incubando 3h con ALA 1mM se acumularon 0,09±0,1 pg porf/céldistribuidos uniformemente en los distintos planos del esferoide(microscopía confocal); se irradiaron con 2 tubos fluorescentesy 1h despues se observo desprendimiento de células muertas,disrupción de la membrana y núcleos condensados. La activaproliferación celular (marcación con Ki67) de los EMCs notratados, se redujo luego de la TFD a un cordón de célulasproliferativas en la periferia y escasa marca hacia el interiorde la estructura. La condición hipóxica basal en los EMCs notratados mostro un perfil heterogéneo de localización nuclearde HIF1-α que se incremento con una dosis lumínica baja (5min) y explica la menor generación de ROS comparada con lamonocapa, signos de apoptosis disminuidos (condensaciónnuclear, liberación de Cit c, despolarización mitocondrial,activación de caspasa-3, Annexina) e indicios de necrosis yautofagia (expresión de Bcl-2 y LC3-II). La detección de ROSno fue significativamente diferente en presencia y en ausencia de antioxidantes de alto grado de protección (ascorbato ytrolox, segun los cultivos en monocapa), pero por microscopiade fluorescencia se vio un efecto protector a nivel superficialen las capas externas de los EMCs (NA/BE), sugierendo que elfotodaño a los tejidos normales puede ser atenuado mediantela administración de agentes antioxidantes.