ACCIÓN DEL VANADATO SOBRE LA EXPRESIÓN DE LA -AMINOLEVULINATO SINTETASA EN CÉLULAS HEPÁTICAS C3A

RODRIGUEZ LORENA; OLIVERI, LEDA; CODESIDO MAGDALENA; SPELT VICTORIA ; BATLLE, ALCIRA; GEREZ ESTHER

Congreso; Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2012

Sociedad de Argentina De Investigacion Clínica

La porfiria aguda intermitente (PAI) se caracteriza por una disminución en la actividad de la PBG-deaminasa asociada a un marcado incremento en la expresión de la d-aminolevulinato sintetasa (ALAS). Se ha demostrado en roedores y embriones de pollo que la insulina inhibe o previene la inducción de la enzima ALA-S. En trabajos previos hemos demostrado in vivo que el vanadato, agente insulinomimético, tiene un efecto negativo sobre la transcripción del ALA-S lo cual permite considerar al vanadato como potencial agente terapéutico para el tratamiento de la PAI. Sin embargo, los resultados obtenidos con el animal entero pueden ser de difícil interpretación al intentar dilucidar los complejos mecanismos regulatorios de feedback que involucran múltiples efectores. Por ello, con el objeto de complementar los resultados obtenidos con vanadato in vivo se evaluaron los efectos de dicha droga en cultivos de la línea establecida de hepatoma humano C3A. Las células se crecieron en medio DMEM bajo en glucosa (5mM) y sin suero durante diferentes tiempos. Las células tratadas con vanadato se crecieron durante 18 hs sin suero y luego se le administró el vanadato 1, 2, 3 µM durante 1, 3 y 6 hs. Las células control se las trató con el vehículo correspondiente. El tratamiento con vanadato provocó una caída del 56% en los niveles de proteína del ALA-S mitocondrial y citoplasmática, y esta caída fue acompañada con un aumento de 3,6 veces en la fosforilacion de Akt (ser 473) y una caída del 37% en los niveles nucleares del factor de transcripción FOXO. Además se observó una disminución de 33% en la fosforilacion (ser 133) del factor de transcipción CREB. Estos resultados están en concordancia con nuestros datos obtenidos in vivo lo cual nos permite concluir que el modelo utilizado resulta adecuado para seguir investigando los mecanismos de acción del vanadato y su posible utilización en el tratamiento de la PAI.