Genética molecular en la vigilancia entomológica de vectores de Leishmaniasis: evaluación del marcador molecular Cacophony-IVS6

MOYA SL; GIULIANI MG; MANTECA ACOSTA M; SALOMON OD; LIOTTA DJ

Posadas

Congreso; 1 ER CONGRESO NACIONAL DE ESTUDIANTES DE GENÉTICA; 2015

Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales ; Posadas : Asociación Misionera de Estudiantes de Genética,

Las leishmaniasis son enfermedades producidas por parásitos (Leishmania spp.) transmitidos por la picadura de vectores pertenecientes a la subfamilia Phlebotominae (Díptera: Psychodidae). No todas las especies de flebótomos poseen capacidad vectorial, siendo la presencia/ausencia de especies vectoriales uno de los principales factores a considerar en el control de propagación de la enfermedad. La clasificación taxonómica se basa en caracteres morfológicos y resulta en un procedimiento dificultado por la existencia de variabilidad intraespecífica y especies crípticas, además del tratamiento químico necesario para la observación microscópica que inhibe su posterior análisis mediante técnicas moleculares. En este contexto, se evaluó la aplicabilidad del protocolo PCR-secuenciación de cac-IVS6 en la identificación de especies de flebótomos como alternativa a la clasificación taxonómica tradicional. Se amplificó y secuenció la región cac-IVS6 de 107 flebótomos clasificados por observación de espermatecas según claves taxonómicas. Las secuencias obtenidas de 220 pb permitieron la reconstrucción de árboles de distancia utilizando el algoritmo Neighbor-Joining en el programa MEGA6. Secuencias pertenecientes a diferentes géneros se agruparon en clusters separados, demostrando que el polimorfismo presente en cac-IVS6 es suficiente para diferenciarlos. Como conclusión, el protocolo evaluado logra un poder de discriminación similar al de la clasificación tradicional, permitiendo la correcta identificación de ejemplares cuya determinación morfológica fue incierta. Igualmente, se propone un rediseño del protocolo para generar una secuencia de mayor longitud que aumente la capacidad de resolución, teniendo en cuenta que la pertinencia de la metodología debe evaluarse en función de los objetivos y las especies presentes en el área de estudio.