Evaluación y distribución de la apoptosis en Complejos Ovocito Cumulus inmaduros de cerdas

TELLO, MF; LORENZO, MS; MARURI, A.; CASIRÓ, S.; CETICA, PD.; LOMBARDO, DM.

Taurus - Revista de Reproducciòn Animal

Taurus

Lugar: Buenos Aires; Año: 2012 vol. 14 p. 42 - 45

1515-3037

La evaluación de la calidad del ovocito y su vinculación con la presencia de apoptosis ha adquirido en los últimos años gran relevancia. La clave del éxito en la producción in vitro de embriones es la selección de ovocitos de buena calidad. Sin embargo, existen grandes controversias en el tema. El objetivo de este trabajo fue evaluar la presencia  y distribución de la apoptosis en  Complejos Ovocito-Cumulus (COCs) inmaduros de cerdas y su relación con la morfología. Los COCs fueron clasificados en seis categorías (A1, A2, B1, B2, C, D) bajo la lupa estereoscópica según su morfología y en cada una de ellas se realizaron para la evaluación de la apoptosis temprana, las siguientes técnicas: tinción de Anexina-V, Inmunocitoquímicas de cortes finos de COCs para Caspasa-3 activa, Bax y Bcl-2  y para evaluar apoptosis tardía: el ensayo de TUNEL y evaluación morfológica con H-E y Orceína. Se observó que el porcentaje de COCs en cada categoría es variable. Hubo presencia de apoptosis tanto temprana como tardía en las células del cumulus, y solo apoptosis temprana en los ovocitos. Si bien se evidenció un aumento de la apoptosis en relación a la disminución de la calidad evaluada morfológicamente, éste no se condice con las categorías en las que fueron clasificados los mismos. Se observaron además tanto ovocitos como células del cumulus muertas independientemente de las características morfológicas de los COCs y de la categoría a la que pertenecen. De acuerdo con los resultados obtenidos de la evaluación de la apoptosis, podría considerarse la modificación de algunos parámetros de la selección/clasificación para agilizar la búsqueda de COCs apropiados para la maduración in vitro (MIV) y fecundación in vitro (FIV). Sin embargo, la evaluación morfológica bajo la lupa por sí sola, no permite seleccionar COCs sin daños y no apoptóticos.