CULTIVO DE CÉLULAS LUTEALES PORCINAS COMO SUSTRATO PARA LA MADURACIÓN IN VITRO DE COMPLEJOS CUMULUS OVOCITO PORCINOS. ESTABLECIMIENTO Y CARACTERIZACIÓN

TEPLITZ, G.; MARURI, A.; CRUZANS, PR.; CAROU, MC.; LOMBARDO DM.

SPERMOVA

Asociación Peruana de Reproducción Animal

Lugar: Arequipa; Año: 2016 p. 140 - 143

El objetivo de este trabajo fue establecer y caracterizar el cultivo de célulasluteales porcinas (CLP) para el posterior cocultivo de COC porcinos con el finde promover la maduración ovocitaria. Para el establecimiento ycaracterización del mismo se realizó la disección de cuerpos lúteos obtenidosa partir de ovarios de frigorífico. El tejido luteal se sometió a digestiónmecánica y enzimática con colagenasa IV. La suspensión se filtró y centrifugóy las células se diluyeron en 15 mL de medio DMEM/F12 suplementado y sesembraron en 3 frascos de cultivo T25, incubándose en ambiente controlado yrenovando el medio cada 48 h. Para el análisis y caracterización del mismose realizó la evaluación del contenido de lípidos intracelulares por tinción conrojo Nilo, inmunocitoquímica (ICQ) para 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa(3β-HSD) y determinación de progesterona (P4) por ELISA. Se observó lapresencia de gotas lipídicas citoplasmáticas, una producción de P4 en formacreciente medida a las 48, 96 y 144 h de cultivo y casi la totalidad de lascélulas positivas a 3β-HSD, demostrando la capacidad esteroidogénica de lascélulas en cultivo.