“Efectos pro y antioxidantes de un nanocompuesto (C60) en hepatocitos de zebrafish (Danio rerio)”

LONNÉ, M.N.; SOARES CHAVES, I.; MONSERRAT, J.M; DE LA TORRE, F.R.

Biologist (Lima)

ASEFIM

Lugar: Lima, Perú.; Año: 2009 vol. 7 p. 66 - 66

1816-0719

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Evidencias recientes muestras divergencias en los efectos inducidos por nanocompuesto como el fulereno (C60), particularmente en lo concierne a parámetros de estrés oxidativo. El presente trabajo tuvo como objetivo analizar respuestas tóxicas en hepatocitos de zebrafish (Danio rerio, línea ZFL) expuestos al nanocompuesto fulereno durante 4 h. Fue realizada una solución stock de fulereno (200 mg/L) por agitación durante 2 meses, sin utilizar ningún tipo de solvente. Los hepatocitos fueron mantenidos a 28 oC en medio RPMI con 10% de suero fetal bovino y 1% de antibiótico y antimicótico. Las concentraciones de C60 ensayadas fueron de 0,1; 1 y 10 mg/L, con un tiempo de exposición de 4h, al fin de la cual fueron medidos el número total de células, la viabilidad celular y la producción de especies activas de oxígeno (EAO). El número de células fue estimado por absorbancia en 630 nm, la viabilidad por reducción de MTT (490 nm) y los EAO por fluorescencia a través de la oxidación del substrato H2DCF-DA (ex.: 480 nm; em.: 520 nm), siendo luego relativizado por el número de células viables. Los resultados obtenidos mostraron que: (a) ni el número de células ni la viabilidad celular fueron afectadas por la exposición exposición al C60 (p>0,05); (b) la [EAO] tuvo una respuesta dual, siendo significativamente menor (p,0,05) que el control en la menor concentración (0,1 mg/L) y aumentada en las otras dos concentraciones (1 y 10 mg/L) (p<0,05). Los resultados obtenidos permiten indicar que las respuestas aparentemente contradictorias inducidas por el fulereno pueden en realidad estar muy relacionadas con la concentración. El hecho de que la reducción del MTT es considerada por muchos autores como una medida de la funcionalidad mitocondrial parece indicar que no es esta la fuente de aumento de EAO intracelular. Finalmente el protocolo experimental de 4h mostró ser el más efectivo para evidenciar respuestas celulares al C60.