Desarrollo de una matriz de psedobioafinidad de bajo costo para la purificación de lactoferrina

F. J. WOLMAN; A. A. NAVARRO DEL CAÑIZO; D. GONZÁLEZ MAGLIO; O. CASCONE.

Buenos Aires

Congreso; ETIF 2008; 2008

ETIF

El mayor desafío del downstream processing de proteínas, es contar con matrices cromatográficas que optimicen la relación costo/performance. Tomando como modelo la lactoferrina bovina (Lf), proteína de creciente interés por sus propiedades antimicrobianas, se sintetizó una matriz consistente en macrobolillas de quitosano entrecruzado,  derivatizadas con el colorante Red HE-3B. Se estudiaron 2 entrecruzantes: epiclorhidrina (E) y glutaraldehído (G), y se determinaron los parámetros termodinámicos de adsorción de Lf (capacidad máxima 21,42 y 21,46 mg/g, constante de disociación 0,81 y 0,51 mg/g, para las bolillas entrecruzadas con E y G respectivamente). La elución de la Lf fue máxima al utilizar NaCl 2M + etilenglicol al 25% a pH 7 para ambos sistemas, siendo mayor para las bolillas entrecruzadas con E (60% vs 25%). Al enfrentar las bolillas a calostro bovino, las bolillas entrecruzadas con E mostraron una mejor performance al adsorber el 50% de la Lf presente en la muestra, mientras que las entrecruzadas con G sólo adsorbieron el 27% de la Lf presente. La optimización de la matriz entrecruzada con E permitirá contar con un producto nacional de bajo costo apto para procesar muestras complejas y sin clarificar, como es el caso del calostro bovino o el suero del queso.