Concentración de la proteína E2T del virus de la diarrea viral bovina producida en alfala mediante el sistema de partición en dos fases acuosas

M.S. PÉREZ AGUIRREBURUALDE; F.J. WOLMAN; A. SAMMARRUCO; J. RODRÍGUEZ; A. PECORA; A. OSTACHUK; M. MOZGOVOJ; M.J. DUS SANTOS; O. CASCONE; A. WIGDOROVITZ

Tandil, Provincia de Buenos Aires

Congreso; XXXVII Congreso Argentino de Genética; 2008

Sociedad Argentina de Genética

La utilización de vacunas convencionales para el virus de la diarrea viral bovina (VDVB) presenta ciertas limitaciones por lo que actualmente se está investigando el uso de vacunas a subunidad como una estrategia alternativa. La glicoproteína E2, contiene los principales sitios antigénicos para la producción de anticuerpos neutralizantes (AN), los que juegan un papel preponderante en el fenómeno de protección frente a la infección. La utilización de plantas transgénicas para la expresión de proteínas heterólogas con fines terapéuticos o para su utilización como vacunas ha sido ampliamente reportada. Sin embargo, una limitación importante del sistema, ha sido hasta el momento la baja concentración de las proteínas recombinantes en los tejidos de las plantas. Debido al bajo costo, facilidad de escalado y altos rendimientos de recuperación, este proyecto propone la utilización y  puesta a punto de un sistema de partición de dos fases para la concentración de la proteína E2T (fracción soluble de la E2) expresada de forma constitutiva en alfalfa transgénica. Utilizando el sistema PEG 4000/buffer de fosfatos pH 7, se logró incrementar hasta 10 veces la concentración de la proteína E2T en la fase PEG. Es importante destacar que la eficiencia del proceso fue  aumentando con  el incremento en la escala de trabajo. Estos resultados demuestran, la factibilidad de obtener la  concentración suficiente y posibilidad de escalado  para la formulación de  vacunas basadas en la tecnología desarrollada.