PERSONAL DE APOYO
UDOVIN lucas
congresos y reuniones científicas
Título:
DESARROLLO DE ANTICUERPOS MONOCLONALES NEUTRALIZANTES DE LA ACCIÓN MITOGÉNICA DEL FACTOR DE CRECIMIENTO FIBROBLÁSTICO BÁSICO (BFGF) COMO AGENTE ANTI-ANGIOGÉNICO
Autor/es:
ADRIÁN GÓNGORA; ALEJANDRO G. MLADOVAN; MARTÍN GÓMEZ; LUCAS UDOVIN; ALINA SORDELLI; ALBERTO BALDI
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LI Reunión de la sociedad Argentina de investigación clínica; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación clínica
Resumen:
La angiogénesis es considerada un factor limitante en el crecimiento tumoral y es regulada por el balance entre factores pro y anti-angiogénicos. El VEGF (factor de crecimiento del endotelio vascular) y el bFGF son considerados los principales inductores de la angiogénesis. Como parte de un proyecto de terapia combinada tendiente a controlar la angiogénesis tumoral a través del bloqueo de ambos factores, en este trabajo describimos la generación y loa selección de AMs neutralizantes de la capacidad mitogénica del bFGF humano sobre células endoteliales (HUVEC).El bFGF humano fue clonado, expresado en E. Coli y purificado.Su máxima actividad biológica in Vitro sobre la proliferación de HUVEC se observó a una concentración de 10 ng/ml, similar a un bFGF de origen comercial. Ratones BALB/c fueron inmunizados con el bFGF conjugado con BSA. Los esplenocitos de animales con máxima respuesta fueron fusionados con células de mieloma NS0. Los hibridomas resultantes se seleccionaron por ELISA en función del reconocimiento del bFGF y los clones positivos fueron evaluados en cuanto a su efecto inhibitorio sobre la proliferación de HUVEC estimuladas con bFGF. Aquellos que exhibieron una inhibición específica fueron seleccionados y sus AMs se purificaron. Se determino la concentración inhibitoria (IC50) sobre la proliferación de HUVEC obteniendo los siguientes valores: DB3= 33 ± 5 ng/ml, DA2= 76 ± 7 ng/ml y CC12= 186 ± 11ng/ml. Los dos AMs con menor IC50 fueron caracterizados según su isotipo (ambos igG1) y afinidad por ELISA de competencia, obteniendo valores estimados de Kd de 1,2 nM y 2,5 nM para el DB3 y DA2, respectivamente. El Fab. correspondiente al hibridoma DB3 fue clonado y secuenciado. En el presente, estamos evaluando los efectos anti-angiogénicos y antitumorales de DB3 fue clonado y secuenciado. En el presente, estamos evaluando los efectos anti-angiogénicos y antitumorales de DB3, solo y en combinación con otro AM contra VEGF previamente desarrollado, en un modelo de ratones atímicos inyectados con líneas derivadas de melanomas humanos.