Efectos de cosolutos sobre diagramas binodiales de sistemas bifásicos acuosos

MARIA GUADALUPE BERTOLUZZO; RUBEN RIGATUSO; GISELA TUBIO; GUILLERMO PICO

Rosario, Argentina

Congreso; VII Congreso XXV Reunión Anual. Sociedad de Biología de Rosario.; 2005

Sociedad de Biología de Rosario

Los sistemas bifasicos acuosos se forman cuando se mezclan soluciones acuosas de dos polímeros de cadena flexible o bien un polímero y una sal por encima de una concentración critica. La propiedad mas importante de estos sistemas es la posibilidad de concentrar macromoléculas tales como proteínas en una de las dos fases lo cual constituye el punto de partida de un método de aislamiento y purificación de proteínas en macro escala. El objetivo de este trabajo es la obtencion de diagramas binodiales en presencia de ures y sales de sodio. En un diagrama binodial, en el eje de las ordenadas se representa la concentración de polietilenglicol (PEG), y en el eje de las abscisas la concentración de fosfato de sodio. Los punos por debajo de la curva binodial representan sistemas monofásicos y los puntos por encima de la misma representan sistemas bifásicos. Se utilizó PEG de peso molecular 1450, 4000, 6000 y 8000. Se obtuvieron los diagramas binodiales por el método turbidimétrico. Se colocó, en un tubo de vidrio graduado, 1 g de la solución madre de polímero y se le agregaron cantidades crecientes de fosfato de potasio. La aparción de turbidez se tomó como el inicio de la sepaarción de las fases. Las concentraciones de ambos componentes inmediatamente antes de la aparición de turbidez constituyen un punto de la curva binodial. Se observó que a medida que aumenta el peso molecular del PEG las curvas se vuelven mas asimétricas y próximas al origend e coordenadas. Para sistemas en rpesencia de sales de sodio se observó que aumenta el área bifásica como resulatdo de un fenómeno de «exclusión» del polímero a la sal. Este efecto se acentúa com el aumento del peso molecular del polímero.Sin embargo, el agregadode urea disminuye la zona bifásica, lo cual se podría atribuir a la pérdida de agua ordenada entorno al PEG, produciendo un aumento enla sobulidad mutua entre el PEGE y el fosfato. Como el oxígenodel éter del monómero de polietilenglicol está fuertemente hidratado, com dos o tres molécuals de agua ligadas por puente hidrógeno y la macromolécula de polietilenglicol ejerce una accion hacedora deestructura sobre 16 moléculas de agua por monómero, se concluye que los factores que perturban la estructura del agua tales como urea o sales inorgánicas afectan el proceso de separación de fases.