INVESTIGADORES
TUBIO Gisela
congresos y reuniones científicas
Título:
Purificación de xilanasa fúngica por combinación novedosa de precipitación y cromatografía de interacción hidroóbica
Autor/es:
LIENQUEO, MARIA ELENA; SUBILS, TOMÁS; SALAZAR, ORIANA; TUBIO, GISELA; ROMANINI, DIANA
Lugar:
Concepcion
Reunión:
Congreso; XIX Congreso Chileno de Ingeniería Química; 2014
Institución organizadora:
Departamento de Ingeniería Química (DIQ) de la Universidad de Concepción (UDEC)
Resumen:
La utilización de xilanasa (Xyl), en el blanqueo viene siendo estudiada y aplicada de forma exitosa en los últimos años para sustituir la formación de los tóxicos y mutagénicos. Esta enzima es capaz de romper los enlaces glicosídicos β-1,4 del xilano. El hongo filamentoso Thermomyces lanuginosus es particularmente interesante ya que esta especie es capaz de producir xilanasa libre de celulasa. El objetivo de este trabajo fue diseñar una estrategia de purificación que combina  la formación de complejos insolubles entre xilanasa de T. lanuginosus y poliacrilato (polielecrolito aniónico sintético y de bajo costo) con un paso de cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC). La xilanasa producida por el cultivo de T. lanuginosus fue precipitada con poliacrilato. Las condiciones óptimas de precipitación y redisolución se determinaron por medidas de turbidez (420 nm) a través de barridos de pH, titulaciones turbidimétricas y estudios cinéticos. La mejor condición de precipitación para la enzima fue a pH 4,00 y= 9°C a la relación es de 8 mg de poliacrilato/ g de Xyl. La redisolución se realizó a 20°C, pH 6,00 en fuerza iónica de 0,5M. El rendimiento y factor de purificación obtenidos en esta etapa fueron 31.56% y 12.61, respectivamente. Una alícuota del precipitado redisuelto fue sembrada en una columna de HIC El pico de elución de Xyl coincide en la enzima comercial y con la del cultivo. El cromatograma muestra además un segundo pico de elución sin actividad Xyl el cual permite concluir que una buena resolución de esta etapa de purificación. Aunque los resultados en esta primera etapa han mostrado ser promisorios como combinación de metodologías de purificación, queda aún pendiente la optimización de las condiciones de operación cromatográfica.