Análisis de variabilidad genética en aislamientos de Pseudocercospora griseola asociado a la mancha angular del poroto común

APARICIO M., MERCADO CÁRDENAS G., SPEDALETTI Y., CUELLAR D., SOTOLA E., STENGLEIN S.,GALVÁN M.

Jornada; XIV Jornadas Fitosanitarias Argentinas; 2012

La mancha angular del poroto, cuyo agente etiológico es Pseudocercospora griseola (Sacc.) Crous & U. Braun, se encuentra entre las enfermedades endémicas de mayor impacto en el Noroeste Argentino. El estudio y caracterización del patógeno es de importancia para desarrollar estrategias de manejo de la enfermedad. El objetivo del presente trabajo fue analizar la variabilidad genética en aislamientos de P. griseola recolectados en distintas localidades de las provincias de Salta, Jujuy y Tucumán empleando secuencias ITS-rDNA (inter transcribed spacers). Se realizó la extracción de ADN de 35 aislamientos monospóricos del patógeno mantenidos en medio APG durante 60 días a 25 ±2°C. A partir del ADN extraído se amplificaron las regiones ITS-rDNA mediante PCR utilizando los primers ITS1 e ITS4. Los fragmentos amplificados se separaron por electroforesis en geles de agarosa 1,5% teñidos con GelRedTM y se purificaron para su posterior secuenciación. La identificación de las secuencias se obtuvo realizando una comparación con secuencias de la base de datos del NCBI (Centro Nacional de Información Biotecnológica, www.ncbi.nlm.nih.gov) utilizando el algoritmo Blastn. El alineamiento de las secuencias y su comparación se realizó con ClustalW en el programa BioEdit. A partir del análisis de las secuencias se pudo identificar las variaciones presentes en las mismas y se generó un árbol de Neighbor-joining incluyendo secuencias control correspondientes a aislamientos de P. griseola de diferentes orígenes y hospedantes (Phaseolus vulgaris y Phaseolus coccineus) disponibles en GenBank. Se observó que los aislamientos se agruparon en andinos y mesoamericanos revelando la existencia de gran variabilidad entre los aislamientos estudiados. Este trabajo aporta un valioso conocimiento para el manejo epidemiológico de la enfermedad.