INVESTIGADORES
SOMOZA Gustavo Manuel
congresos y reuniones científicas
Título:
DISEÑO Y EVALUACIÓN DE CEBADORES CONSENSO PARA CYP1A, CYP3A, MT, CYP19A1, CYP19B1 Y VTG EN UN PEZ NEOTROPICAL (CNESTERODON DECEMMACULATUS).
Autor/es:
EDUARDO J. DE SAN BENITO; OMAR MORENO ACOSTA; JUAN I. FERNANDINO; PEDRO CARRIQUIRIBORDE; GUSTAVO M. SOMOZA
Lugar:
San Luis
Reunión:
Congreso; VII Congreso Argentino SETAC Argentina; 2018
Institución organizadora:
SETAC
Resumen:
Las actividades humanas introducen al ambiente una gran variedad de contaminantes (metales, PCBs, etc.). En particular, los ambientes acuáticos actúan como sumideros de dichas sustancias y los peces han sido históricamente utilizados para evaluar los impactos de los contaminantes sobre el medio acuático. Cnesterodon decemmaculatus es un pez ampliamente distribuido en la región, que tiene la capacidad de habitar tanto en ambientes prístinos como en otros con ciertos niveles de contaminación. Existen genes cuya expresión está regulada por receptores nucleares, los cuales al unirse a ligandos específicos inducen la transcripción de los mismos. Entre ellos podemos mencionar el receptor de hidrocarburos aromáticos policíclicos (AhR), el receptor de pregnano X (PXR), el receptor de metales (MTF-1) y el receptor de estrógenos (ER) que en el hígado regulan, entre otros, la expresión de cyp1a, cyp3a, mt y vtg. En este contexto, el objetivo del estudio es el de diseñar una batería de biomarcadores moleculares de exposición para evaluar expresión de genes regulados por receptores nucleares en la especie autóctona Cnesterodon decemmaculatus. En particular en el presente trabajo se informan los resultados obtenidos durante la etapa de diseño y validación de los cebadores para los genes mencionados. Diferentes pares (fwd-rv) de cebadores consenso para cada gen, más ß-actina, fueron diseñados mediante la alineación y búsqueda de regiones de homología entre secuencias (Nucleotide?NCBI) utilizando el paquete de software Lasergene y evaluados in silico con el software Primer Select. Los cebadores fueron evaluados utilizando ADN complementario de hígado de hembras adultas de Cnesterodon decenmaculatus por PCR a tiempo final. El tamaño de los productos obtenidos fue el esperado y, las bandas purificadas y enviadas a secuenciar para la corroboración de las secuencias y el diseño de los cebadores para qPCR. La inducción específica de los genes se validará mediante la exposición a compuestos de referencia (b-naftoflavona, rifampicina, Cd+2, EE2).