Localización de la NADPH diaforasa/sintasa de oxido nítrico en neuronas de la corteza cerebral de pacientes con epilepsia focal quirúrgica.

D`ALESSIO L, LOPEZ COSTA JJ, SEOANE E, CONSALVO D, GIAGANTE B, ODDO S, SILVA W, GUELMAN L, KOCHEN S, ZIEHER LM.

Mar del Plata

Congreso; Reunión de la sociedad de investigación clínica (SAIC).; 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).

Objetivos: Determinar la actividad de la NADPH diaforasa en la corteza cerebral adyacente al área epileptógena, de pacientes con epilepsia focal refractaria e indicación quirúrgica. Introducción: La producción neuronal local de Oxido Nítrico (NO), ejerce una regulación negativa sobre la actividad ictal en determinadas condiciones experimentales. Se ha descripto un aumento de la NO Sintasa (NOS) en corteza temporal y frontal de pacientes epilépticos, a expensas de un aumento de la población de neuronas nitrérgicas tipo II en capas II (GE) y IV(GI). Estos hallazgos sugieren cambios adaptativos del tejido afectado por las descargas, con posibles funciones neuroprotectoras. Métodos: Se obtuvieron muestras de 5 x 5 mm de corteza temporal de tres pacientes con epilepsia temporal refractaria y esclerosis hipocampal asociada, y de la corteza prefrontal adyacente a lesión displásica en un paciente con epilepsia frontal. Las muestras fueron obtenidas en el postquirúrgico inmediato, y fijadas por inmersión en solución de paraformaldehido al 4% durante 24hs. Se obtuvieron secciones de vibrátomo que fueron procesadas por histoquímica de NADPH diaforasa. Las secciones fueron incubadas en una solución conteniendo 1mg/ml de B-NADPH y 0,2 mg/ml de nitroblue tetrazolio en buffer fosfato 0,1 M a 37ºC durante 1 hora. Las secciones fueron montadas con PBS/glicerol, observadas y fotografiadas con un microscopio óptico Zeiss Axiophot. Resultados: En todas las secciones encontramos dos tipos de neuronas nitrérgicas descriptas en los mamíferos. Se observó un predominio de neuronas tipo II en capas II y IV. Estas neuronas son de menor tamaño, más abundantes, menos reactivas, se visualizan núcleos negativos, y las prolongaciones son arrosariadas. Por su morfología se distinguen dos subtipos; granulosas y fusiformes Las neuronas tipo I fueron observadas principalmente en capas mas profundas, V y VI, y en sustancia blanca subcortical. Presentan mayor tamaño y mayor reactividad, y sus prolongaciones poseen espinas dendríticas. Conclusiones: Los hallazgos del presente trabajo concuerdan con resultados de otros investigadores y muestran un patrón diferencial en la distribución de las neuronas nitrérgicas tipo I y II en la corteza temporal y frontal de pacientes con epilepsia focal.