Transcriptos diferencialmente expresados en plantas de Eragrostis curvula asociados a cambios en el nivel de ploidía

JUAN P. SELVA; NATALIA LASPINA; MARTÍN A. MECCHIA; GERARDO D CERVIGNI; LUCIANO G. MARTELOTTO; SILVINA PESSINO; VIVIANA ECHENIQUE

San Luis, Argentina

Congreso; XXXV Congreso Argentino de Genética; 2006

El pasto llorón es una forrajera apomíctica, modo de reproducción estrechamente relacionado con la poliploidía. La poliploidización natural o inducida suele estar asociada a alteraciones genéticas y epigenéticas que afectan distintas regiones del genoma. El mantenimiento de la homeostasis durante este proceso involucra cambios a nivel de la expresión de ciertos genes, cuya identificación aportaría valiosa información acerca de los rearreglos genómicos en estas condiciones y de los mecanismos involucrados en la apomixis. El objetivo de este trabajo fue analizar los cambios en la expresión génica en un genotipo diploide de Eragrostis curvula y el correspondiente tetraploide obtenido por duplicación con colchicina utilizando display diferencial. Se extrajo ARN de panojas inmaduras y se retrotranscribió utilizando como cebadores oligonucleótidos poli-T. Hasta el momento se ensayaron 16 combinaciones de cebadores anclados y al azar. Se analizaron 1600 bandas de los cuales 70 fueron diferenciales (60 correspondieron al genotipo diploide y 10 al tetraploide). Los fragmentos correspondientes fueron aislados y clonados. Se secuenciaron hasta el momento 14 fragmentos provenientes del genotipo diploide y 7 del tetraploide. Mediante análisis de BLAST se encontró que 10 de las 22 secuencias mostraron identidad con reguladores de transcripción, ATPasas, kinasas, transportadoras de lípidos y proteínas de elementos móviles (gag-pol poliproteina y transposasas), 3 con proteínas hipotéticas y 9 no mostraron identidad con secuencias conocidas. Los niveles de expresión de los genes identificados se controlará contra las bases de datos de ESTs provenientes de genotipos diploides y poliploides de esta especie y con el perfilado del transcriptoma de otras especies.