MUTANTE DAM (DNA ADENINA METILASA) DE SALMONELLA ENTERITIDIS COMO POTENCIAL CEPA VACUNA/VECTOR

SARNACKI, SEBASTIÁN HERNÁN; GIACOMODONATO, MÓNICA NANCY; CACCURI, ROBERTO; SISTI, FEDERICO; CERQUETTI, MARIA CRISTINA.

Mar del Plata, Argentina,

Congreso; 48º Reunión Anual SAIC / 51º Reunión Anual SAI.; 2003

Sociedad Argentina De Investigación Clínica (SAIC) y Sociedad Argentina de Inmunología (SAI).

Las cepas atenuadas de Salmonella spp. han dado origen a una nueva estrategia para el tratamiento de tejidos neoplásicos. Estas bacterias se multiplican en forma selectiva en tumores inhibiendo así su crecimiento. Las cepas de S. typhimurium que carecen totalmente de la proteína Dam se han propuesto como las mejores vacunas contra la salmonelosis ya que son incapaces de invadir enterocitos o de causar citotoxicidad. Estas características, sin embargo, no permitirían su uso como vectores para el transporte de proteínas terapéuticas hacia los tumores. Hemos obtenido una mutante dam de S. enteritidis (SD1) que no carece totalmente de Dam, sino que porta una proteína defectuosa (diez aminoácidos más corta) y muestra un fenotipo “leaky” presentando ADN con adeninas metiladas y no metiladas. SD1 resultó ser altamente inocua en el ratón (DL[50] oral >10(9) cfu) y además protectiva. Los ratones Balb/c inmunizados con 10(10) cfu de SD1 depuraron del bazo a la cepa virulenta de S. enteritidis más eficientemente que los animales controles. Asimismo, un 40% de los animales inmunizados sobrevivieron al desafío con la cepa salvaje de S. enteritidis. Se encontró que SD1 induce in vivo niveles significativos (p < 0.01) de IFN-gamma ?intestinal determinados por ELISA; (509 + 62 pg/ug de proteínas en animales inmunizados vs 308 + 20 pg/ug de proteínas en los controles). La microscopía electrónica reveló cambios histológicos en placas de Peyer’s (PP), sugiriendo que SD1 es capaz de inducir citotoxicidad e invadir PP luego de la inoculación dentro de una ligadura del íleo. En concordancia con estos resultados, mediante la técnica de Western blot, se encontró que SD1 expresa proteínas de invasión (SipA, SipB y SipC).