INVESTIGADORES
SARNACKI Sebastian Hernan
congresos y reuniones científicas
Título:
Salmonella en biopelícula resulta menos virulenta que en estado planctónico.
Autor/es:
SARNACKI SH; AYA CASTAÑEDA MDR; GARÓFALO A; GIACOMODONATO MN; CERQUETTI MC; NOTO LLANA M
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología (CAM) - 2019; 2019
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología (AAM)
Resumen:
Introducción: La formación debiopelículas sobre los alimentos representa un problema para la salud públicaya que se  asocia a más del 80% de lasinfecciones bacterianas. En los últimos años se ha acumulado evidencia de quepatógenos humanos, como {Salmonella}Enteritidis ({S}E) crecenpredominantemente formando biopelículas, más que en forma planctónica. Objetivo: Determinar, larespuesta generada en el hospedador según el estado de vida de la bacteriainfectante.Metodología: La cepa salvaje {S}E 5694 fue cultivada en dos condiciones de vida;biopelícula o planctónica. Para la condición de biopelícula, se cultivó encaldo LB sin cloruro de sodio, a 28°Cpor 48 hs sin agitación y para la planctónica, en caldo LB a 37ºC con agitación hastaalcanzar una densidad óptica de 0,6 a 600nm. Modelo murino: ratones BALB/c se inocularon vía intragástrica con 1-3x10^3, 1-3x10^4 y 1-3x10^5 UFC de la bacteria encada condición de vida. Cinco días post inoculación (pi) se analizó lasobrevida, la colonización bacteriana, el peso esplénico, y la histologíaintestinal. En otros ensayos, los animales fueroninoculados intraperitonealmente con 0.5 mg/kg de LPS de {S}Eextraído a partir de cultivo en  condiciones de biopelícula o planctónico. Los niveles de citoquinas en sangre sedeterminaron por ELISA antes de la administración del LPS, 6 y 24 hs pi. Modelocelular: cultivos de células endoteliales Ea.hy926 se inocularon con una multiplicidad de infección de 10, con losdos modos de vida de la bacteria. Se evaluó la capacidad de invasión y la expresiónde IL a los 90 min pi. Resultados: En el modelomurino, ningún animal murió cuando fue inoculado con 1-3x10^3 UFC de {S}Een biopelícula, mientras que la misma cantidad de UFC de inóculo planctónicoprodujo una mortalidad del 25% de los ratones. Este porcentaje recién sealcanzó con una dosis infectiva de {S}Een biopelícula de 2 órdenes más alta, junto con una superior colonización delbazo. Independientemente de la dosis infectante, encontramos mayor conservaciónestructural del intestino de los animales inoculados con biopelículas de {S}E en comparación con aquellos inoculados con lamisma dosis del estado planctónico. También determinamos que el LPS planctónicoinduce mayores niveles de IL-6 y TNF-a circulante que el extraído debiopelículas. De igual manera, en células en cultivo, la biopelícula de {S}E mostró tener menor capacidadinvasiva induciendo cantidades disminuidas de IL 6 y 8 respecto a las inducidas por aquellas enestado de vida libre. Conclusión: El modo de vida en biopelícula de {Salmonella} es menos virulento e invasivo e induce menor respuesta inflamatoria que sucontraparte planctónica. Esto podría deberse ?en parte- a la disminuidaactividad inflamatoria observada producida por el LPS extraído del estado debiopelícula de {Salmonella} comparadocon el planctónico.Sin dudas, se necesitan más estudios para la comprensión de la función dela biopelícula de {Salmonella} en lavirulencia.