INVESTIGADORES
SARNACKI Sebastian Hernan
congresos y reuniones científicas
Título:
Participación de la enzima Adenina metilasa (Dam) en la regulación de la producción de biopelícula en Salmonella Enteritidis
Autor/es:
AYA CATAÑEDA, MARÍA DEL ROSARIO; SARNACKI, SEBASTIÁN HERNÁN; LÓPEZ GUERRA, ADRIANA GABRIELA; NOTO LLANA, MARIÁNGELES; CERQUETTI, MARÍA CRISTINA
Lugar:
Parnaíba
Reunión:
Simposio; Simpósio Latino-Americano de Biotecnologia do Nordeste; 2013
Institución organizadora:
Biotec, CENPAT-CONICET y Delta Científica
Resumen:
Objetivo: Estudiar la participación de la
enzima Dam, en la regulación de formación de biopelícula en Salmonella Enteritidis.
Resultados: Mediante mutagénesis dirigida se
generó una cepa isogénica carente del gen dam
(S.EΔdam) de la cepa S. Enteritidis 5694. S.EΔdam pierde la capacidad de formar biopelícula
en la interfase aire-liquido en caldo Luria Bertani sin NaCl (LBNaCl-). En placas
de 96 pozos de plástico policloruro de vinilo teñidas con cristal
violeta al 1%, S.EΔdam mostró una disminución del 64% en la
capacidad de formar biopelícula comparada con la cepa salvaje. En placas de
LBNaCl- suplementadas con rojo congo y azul de coomasie, se evidenció que S.EΔdam
es deficiente en la producción de curli y celulosa. Cuando se determinó la
expresión del gen central en la regulación de biopelícula, csgD, mediante PCR en tiempo real, se evidenció una disminución del
66% en los niveles de este transcripto respecto a la cepa salvaje. Análisis bioinformáticos
revelaron sitios potenciales de metilación de la enzima Dam en el gen csgD.
Conclusiones:
Este reporte se constituye en la primera evidencia de
la participación del regulador global de genes dam, en la regulación de la formación de biopelícula en S. Enteritidis. El efecto se estaría
generando posiblemente mediante regulación directa en el gen csgD. Estos resultados contribuyen a la descripción
de las vías de regulación en la producción de biopelículas, lo cual está
directamente relacionado con la capacidad de virulencia, la expresión de
factores de patogenicidad y la persistencia en diferentes nichos ecológicos de S. Enteritidis. Las cepas atenuadas mutantes
dam de Salmonella, propuestas como vacunas en aves y ganado, con
deficiente producción de biopelículas persistirían menor tiempo en el ambiente
y serían más susceptibles al efecto de antibióticos y desinfectantes. Dam parece ser un nuevo foco de estudio
para modelos de erradicación e ingeniería de biopelículas.
