Mecanismos inmunes responsables del rechazo tumoral de un linfoma murino genéticamente modificado para expresar las moléculas coestimuladoras del RcT, CD40, CD40L y CD80

RUYBAL PAULA; GRAVISACO MARIA JOSE; DE LUCA PAOLA; ESCALADA ANA; WALDNER CLAUDIA; MONGINI CLAUDIA

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; I Congreso conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

Sociedades Argentinas de Investigación Clínica, Inmunología, Farmacología Experimental, Biología, Biofísica, Neuroquímica, Fisiología

La activación de los LT requiere de tres señales: la presentación de antígenos del tumor por el CMH, las producidas por moléculas coestimuladoras del RcT y señales de propagación (citoquinas). El objetivo fue estudiar los mecanismos inmunes desencadenados por las células del linfoma LBC transfectadas con CD40L (LBC.40L), CD40 (LBC.40), y CD80 (LBC.80), al ser inoculadas en ratones singeneicos. Se realizaron curvas de sobrevida con lotes de 6 ratones BALB/C inoculados i.p con 10(6) células LBC, LBC.40L, LBC.40 y LBC.80. El 100% de los ratones inoculados con células LBC ó transfectadas con el plásmido Mock murieron con un TM50 de 18 días. El 75, 60 y 65% de los ratones inoculados con LBC.40L, LBC.40 ó LBC.80, respectivamente, no desarrollaron el tumor y permanecen vivos después de 9 meses post-inoculación. Los mecanismos inmunológicos involucrados se determinaron por citotoxicidad específica (CTXe), ELISPOT para IFNg, citometría de flujo y curvas de sobrevida de ratones atímicos. Demostramos la presencia de CTXe en esplenocitos de ratones que rechazaron las células LBC.40L, LBC.40 ó LBC.80, (62, 74, 20 %, respectivamente) detectándose por citometría de flujo principalmente poblaciones de LT CD8 y CD4. Se obtuvieron células secretoras de IFNg en los esplenocitos de los ratones que rechazaron a las células LBC.40L, LBC.40 ó LBC.80 [21, 46 y 8 spots/10(6)células, respectivamente, y O spots/10(6) para los controles negativos]. El 67% de los ratones inoculados con LBC.40L, no desarrollaron el tumor y permanecen vivos después de 9 meses post-inoculación. El 100% de los ratones NUDE inoculados con células LBC.CD40 ó LBC.80, murieron con un TM50 de 23 Y 39 días, respectivamente. Los mecanismos estudiados que participarían del rechazo de las células transfectadas con moléculas coestimuladoras serían: los LTc para LBC.CD40 y una combinación de LTc y mecanismos innatos para LBC.CD40L y LBC.CD80.