Reevaluación de MLST para la tipificación molecular de Leptospira sp. ¿Se puede inferir el serogrupo a través del perfil alélico?

VARNI VANINA; RUYBAL PAULA; TOMASINI NICOLÁS; LAUTHIER JUAN JOSÉ; BRIHUEGA BIBIANA; KOVAL ARIEL; CAIMI KARINA

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

La leptospirosis es una enfermedad causada por distintas especies del género Leptospira sp., y es importante su estudio epidemiológico ya que constituye una zoonosis de amplia distribución mundial. Tradicionalmente, las cepas de Leptospira se clasifican por métodos serológicos que presentan una alta complejidad en su aplicación y obtención de resultados. Recientemente se han desarrollado métodos moleculares alternativos para la tipificación de aislamientos. Entre ellos, la metodología de multilocus sequence typing (MLST) permite genotipificar las especies patógenas de Leptospira, siendo una de sus principales ventajas la comparación de diferentes aislamientos a través de su perfil alélico a nivel global. Si bien se han propuesto diferentes esquemas de MLST para Leptospira, no existe un consenso general para su aplicación, lo que facilitaría la comparación de cepas y aportaría información epidemiológica a nivel mundial. Este estudio tuvo como objetivo principal la reevaluación de los distintos loci que componen los esquemas de MLST más utilizados con el fin de seleccionar aquellos más discriminativos y proponer un nuevo esquema que permita describir mejor la variabilidad de Leptospira en un contexto global. Para ello se evaluaron distintos parámetros propios de cada locus, y se determinaron las relaciones filogenéticas entre las secuencias concatenadas e individuales de los mismos, mediante el método de máxima verosimilitud (ML). Asimismo se aplicó el algoritmo goeBURST para establecer relaciones entre los distintos perfiles alélicos. En base a los resultados de estos análisis se obtuvo un esquema combinado de 7 loci. Dicho esquema presentó un alto poder discriminatorio, sustentando la clasificación interespecífica de los aislamientos e incrementando la resolución intraespecífica. A partir de estos resultados se investigó la correlación entre el perfil alélico de los aislamientos y su clasificación serológica. Se demostró que los aislamientos que presentaban los perfiles alélicos mayoritarios denominados ST52 y ST47, pertenecían a los mismos serogrupos: Pomona e Icterohamorragiae respectivamente, siendo estos los principales serogrupos circulantes en nuestro país. Este dato es de sumo interés para desarrollar una aproximación a la clasificación serológica de aislamientos a partir de su perfil de MLST lo que permitiría acortar los tiempos de tipificación y aportar información al control epidemiológico de esta enfermedad.