BIOSEPARACION DE ENZIMAS DE Aspergillus niger GH1 DE UNA FERMENTACIÓN EN ESTADO SÓLIDO MEDIANTE PRECIPITACIÓN CON POLIACRILATO

GARCIA GALINDO, A. IVANOE; ROMANINI, DIANA; PICÓ, GUILLERMO; AGUILAR, CRISTOBAL

Santa Fe

Simposio; 3er SaProBio, Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos; 2014

Universidad del Litoral

El hongo filamentoso Aspergillus niger es un microorganismo muy empleado en el campo de la biotecnología debido a la versatilidad en las enzimas que es capaz de secretar al medio y es usado para la digestión de residuos y biotransformaciones. Es un microorganismo industrialmente demandado para muchas aplicaciones incluyendo la producción de alimentos, bebidas, papel y biocombustibles. En el medio ambiente, A. niger se encuentra en el suelo donde se descompone el material vegetal mediante la secreción de una serie de enzimas lignocelulosicas para luego absorber azúcares simples. La biomasa lignocelulósica esta compuesta principalmente por tres importantes polisacaridos de la pared celular vegetal; celulosa, hemicelulosa, pectinas y xilanos. La presencia de este hongo lo inducen a producir algunas de la hidrolasas más demandadas de la industria: celulasas (endoglucanasa, beta-glucosidasa y exoglucanasa), invertasa, amilasas, pectinasas y xilanasas. A. niger es un microorganismo muy probado tanto en cultivos líquidos como en medio sólido. Esta última tiene la ventaja de poder emplear desechos agrícolas e industriales como soportes sólidos los cuales funcionan también como nutriente e inductores de la producción de ciertas enzimas. Además, posee bajos requerimiento de agua y los hongos filamentosos crecen en un ambiente muy similar al natural, lo que la posiciona como una metodología ecológica y de muy bajo costo, de la cual se han obtenido excelentes resultados a gran escala. En los últimos años, el desarrollo de la síntesis de polímeros sintéticos ha permitido emplearlos en nuevas estrategias para satisfacer tanto aplicaciones científicas como industriales. Los mismos se vienen empleando exitosamente como matrices de cromatografía, de inmovilización de enzimas y como ligandos de afinidad para la precipitación selectiva de proteínas. En cuanto a esta última aplicación, el proceso de precipitación por formación de un complejo polímero iónico-proteína requiere de un exhaustivo análisis de variables del medio y de la biomolécula (la cual debe preservar su integridad conformacional cuando es redisuelta del pellet). También debe tenerse en cuenta que debe conservar intacta su actividad catalítica cuando la proteína involucrada es una enzima. La precipitación de enzimas empleando polímeros cargados presenta beneficios respecto a los métodos tradicionales respecto a los costos y a los tiempos de purificación. La misma puede ser empleada como una primera etapa extractiva o clarificado, o bien como única etapa para aquellos procesos industriales que no requieran altos grados de pureza. El objetivo del siguiente trabajo fue el analizar el rendimiento, el factor de purificación y las condiciones óptimas para la purificación de las enzimas de Aspergillus niger GH1( Xilanasa, Celulasas, e Invertasa) a partir de una metodología de purificación de enzimas que reducen etapas y costos respecto a las tradicionales